采集前列腺癌组织用于生物样本库：一种磁共振成像引导的靶向技术以从新鲜肿瘤组织中获取活检穿刺样本

摘要

来源：Heavey, S. 等. 利用磁共振成像与活检数据指导前列腺癌生物样本库的取样流程。视觉化实验杂志 (2019)

本视频展示了一种基于 MRI 数据的技术，用于靶向前列腺组织中含肿瘤的特定区域进行取样。所采集的活检样本可用于生物样本库保存，或用于后续下游分析。

方案

所有涉及人类参与者的操作均按照机构、国家和国际有关人类福祉的指南进行，并已通过当地机构审查委员会的审查。

1. 前列腺切片装置

1. 购买前列腺切片装置（材料表）。或者，使用3D打印机打印刀片手柄。

2. 肿瘤靶向

1. 查阅临床记录，根据诊断性活检结果确定索引病灶的位置，例如左侧后部。
2. 回顾 MRI 图像，测量上述肿瘤的位置。
   1. 找到在轴状面上肿瘤显示最清晰的序列，例如 T2 加权像。
   2. 逐层浏览轴状面图像，找到肿瘤面积最大的层面，并打印该图像以供参考。
   3. 在相应的冠状面图像上，测量从前列腺基底部到所选轴状面位置的距离，以及前列腺从尖部到基底部的全长（mm），并打印以供参考。

3. 前列腺的采集

1. 检查患者病历，确保已为此操作及任何后续研究应用获得适当的知情同意。
2. 行根治性前列腺切除术后，将前列腺组织置于干燥容器中。确保未向前列腺组织中添加福尔马林或其他固定液。
3. 转移至合适的无菌环境进行取样，例如病理科的超净工作台。
4. 如需新鲜组织，应尽快进行取样。
   注意： 对于某些应用（例如DNA检测，其降解速度较RNA慢），可将标本冷藏，并于次日取样。

4. 样品制备

1. 根据当地去污染规程，采用无菌技术准备层流罩和前列腺切片装置。此处，喷洒70%乙醇并擦拭所有表面。使用无菌的一次性针头和手术刀。切片刀片最多可使用三次；每次使用后用热水和肥皂清洗，然后喷洒并用70%乙醇擦拭。
2. 使用标准天平称量前列腺重量（g）。
3. 对前列腺进行染色标记：左侧涂蓝色墨水，右侧涂黑色墨水。将墨水覆盖整个包膜和精囊，以便后续标识手术切缘。
   注意：染色标记操作可根据当地规程有所不同，并相应调整。

5. 前列腺切片

1. 将切片装置的侧壁垂直插入支架底座中，组装切片装置（图1A）。
2. 放置前列腺，使其基底部和尖端分别朝向相对的两个侧壁，后侧朝下，前侧朝上。在前列腺周围放置金针。如有必要，可将前列腺稍向内推，以实现紧密贴合，从而在切片过程中提供支撑。
3. 使用直尺测量前列腺从基底部到尖端的长度，并与磁共振成像（MRI）测得的前列腺长度进行比较。如果前列腺发生收缩，则需对预期的从基底部到目标横切面的距离进行经验性校正。例如，若MRI图像中前列腺全长为50 mm，而此时用直尺测量显示已收缩至45 mm，则应将预期切片位置缩短10%。
4. 从基底部开始测量至所需横切面的位置，并选择最接近该测量值的金针作为切片参考。
5. 佩戴防割链甲手套以防受伤，手持切片装置（图1B），将刀片置于选定金针的两侧，并使用间隔器使两刀片之间保持5 mm间距。通过长距离缓慢而有力地向下、向前和向后移动刀片进行切片（图1C）。在拆卸装置前，确保已完全分离出一个完整的切片。
6. 移除侧壁和金针，戴着手套小心地将切片转移至无菌软木板上。

6. 组织取样

1. 肉眼检查横断面切片，并与轴向 MRI 图像进行比较。在某些情况下，肿瘤区域可能比周围组织颜色更浅。
2. 轻轻触诊横断面切片。在某些情况下，肿瘤可能比周围组织更坚硬。
3. 以轴向 MRI 图像为引导，选择一个或多个取样区域。
4. 对所需组织区域进行穿刺活检取样。
   1. 使用直径 6 mm 的穿刺针，按压至所需组织区域。
   2. 原位旋转穿刺针并向下压紧软木垫，以确保完全分离；必要时使用锋利的手术刀进行分离。
   3. 取出穿刺针，通过推动活塞将组织推出，按需放入试管或模具中。
   4. 根据需要，使用单独的无菌穿刺针重复获取其他肿瘤及良性组织样本。用红色墨水标记穿刺取样后留下的孔洞。
   5. 记录每个穿刺样本的位置，以及前列腺的重量和任何关于组织颜色/硬度的观察结果。

结果

图1：前列腺切片装置。 （A）壁板垂直插入底座中，金制插针插入底座中，围绕前列腺（前列腺未图示）。（B）可更换的平行刀片插入刀片手柄中。（C）刀片穿过金制插针之间，以切取前列腺的5 mm组织切片

材料

本文使用的材料清单

姓名	公司	目录编号	评论
6 mm 活检穿孔器	Fisher Scientific	13404607	一次性活检打孔器，用于获取6 mm组织样本
黑色墨水	Leica Biosystems	3801753	组织标记 & 示踪染料
蓝色墨水	Leica Biosystems	3801751	组织标记 & 示踪染料
链甲手套	Arco	1456803	切割时佩戴链甲手套以保护手部
软木板	Fisher Scientific	12396447	用于固定前列腺以进行后续取样操作的软木板
针头	科学实验室用品（SLS）	SYR6112	用于取样后将组织固定在软木板上的无菌针头
前列腺切片装置	伦敦癌症研究所	NA - 必须在材料转让协议（MTA）下获得	包含切片刀手柄、刀片、垫片、底座、侧壁和销钉的套装