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肾包膜肿瘤异种移植:一种生成实验动物模型以评估前列腺癌变的技术

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肾包膜肿瘤异种移植:一种生成实验动物模型以评估前列腺癌变的技术

July 8, 2025

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Abstract

来源:Nicholson， T. M. et al.肾胶囊异种移植和皮下颗粒植入术用于评估前列腺癌发生和良性前列腺增生。J. Vis. Exp.（2013 年）

在本视频中，我们演示了将人源性前列腺癌组织移植物植入免疫功能低下受体小鼠的肾包膜中。该技术可用于评估肿瘤进展和开发新的治疗策略。

Protocol

所有涉及动物模型的程序均已由当地机构动物护理委员会和 JoVE 兽医审查委员会审查。

1. 外科手术:肾胶囊异种移植术

  1. 在麻醉诱导之前，观察鼠标以确保健康和福祉。
  2. 将鼠标放入腔室中，以诱导 3-5% 的异氟醚麻醉。当动物停止移动且呼吸频率降低时，转移到俯卧位的鼻锥，并保持 1-3% 的麻醉。
  3. 如有必要，请使用剪刀剃掉鼠标的背面。当使用无胸腺裸 （nu/nu） 小鼠时，不需要这样做。
  4. 用力按压伸出的后足的蹼，以评估麻醉的充分性。如果鼠标对压力有反应，则需要更多时间才能使麻醉生效。如有必要，稍微调整麻醉流量以实现充分麻醉。
  5. 当小鼠充分麻醉后，用手术碘 （Betadine） 溶液消毒手术部位，然后用 70% 酒精消毒。
  6. 戴上无菌手套和长袍;在手术部位贴上无菌窗帘。用一把带齿的镊子提起背部皮肤，然后用粗剪刀做一个 2-3 厘米的背中线切口。
  7. 使用钝剪刀或探针，将下面的真皮与体壁分开（双侧移植在切口的两侧或单侧移植的一侧）。
  8. 将鼠标重新定位到横向位置，并通过通过肌肉壁查看肾脏概况来识别肾脏的位置。用拇指和食指轻轻按压腹部可能有助于观察内部器官。
  9. 使用细虹膜剪刀并注意避开主要血管和脊神经，在平行于脊柱的体壁上切开 1 厘米。将剪刀放入初始切口后，轻轻地将剪刀打开，将切口扩大到 1.5-2.0 厘米（略长于肾脏的长轴）。
  10. 用食指和拇指在肾脏两侧的肌肉壁外轻轻按压，使肾脏向外。将皮肤边缘塞入外侧肾脏下方，肾脏将放在体壁上。当肾脏外化时，通过涂抹无菌盐水来维持肾包膜的水合作用。
  11. 使用细 #5 镊子，轻轻地将肾胶囊从肾实质中提起，然后用细手术刀在胶囊上切开 2-4 毫米。切口的大小取决于移植物的大小，但应尽量减少以保持胶囊的完整性。
  12. 作玻璃巴斯德移液管，该移液管已被拉得很薄并经过火抛光，在胶囊下方有一个圆形的封闭端，与肾脏表面相切。轻轻打开一个小胶囊袋用于移植物，要非常小心，不要损坏肾实质。
  13. 用细镊子抬起肾囊的切边，并使用火焰抛光玻璃移液管将移植物插入胶囊下方的口袋中。可以将几个移植物放置在肾包膜下，并在肾脏表面均匀分布。
  14. 如果在移植过程中胶囊脱水，应使用无菌盐水将其弄湿。
  15. 移植完成后，轻轻提起肌肉壁切口的两侧，将肾脏放回体腔中。观察移植物不会从胶囊下方滑出。
  16. 用单缝合线（4-0，FS-2 维克林缝合线）闭合肌肉壁。可以通过重新定位鼠标在对侧肾脏上重复外科手术。
  17. 使用齿形镊子对齐皮肤切口边缘，并使用 2-3 个手术伤口夹来闭合切口。给予镇痛（我们使用 5-10 mg/kg 卡洛芬皮下注射）并将鼠标置于恢复笼中的侧卧位。确保用 lamp 或加热垫的热量维持体温。观察鼠标是否完全恢复，这应该在 15 分钟内完成。
  18. 在接下来的 24 小时内，应观察小鼠是否有术后疼痛、出血和/或其他并发症的迹象。定期检查手术切口是否有感染迹象。
  19. 手术后 7-14 天用手术伤口夹去除装置去除伤口夹。

Disclosures

No conflicts of interest declared.

Materials

<表格border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"> 无菌手术衣 中西部兽医供应 350.79866.2 外科口罩 中西部兽医供应 编号 350.50111.2 无菌手套 金伯利·克拉克 55092 反射式理发器 F.S.T. 编号 12031-09 对应绕线夹尺寸 薇乔线缝合线 中西部兽医供应 电话:295-92100.2 4-0， FS-2， 可吸收 直尖/钝剪刀 精细科学工具 （F.S.T.） 编号 14054-13 Graefe 镊子（锯齿状、齿状、弯曲） F.S.T. 11055-10 异氟醚蒸发器 Supera 麻醉创新 VAP3000 感应室 Supera 麻醉创新 RES644 系列 玻璃巴斯德 pippets Fisher Scientific 公司 S67050 系列 5" 长度 Graefe 镊子（锯齿状、弯曲） F.S.T. 邮编 11052-10 Graefe 镊子（锯齿状、直型） F.S.T. 11050-10 优碘 韦伯斯特兽医 电话:07-836-3379 无菌盐水 中西部兽医供应 193.74504.3 NaCl 0.9%，注射剂 Cotton Tip 涂抹器 中西部兽医供应 001.06220.2 缠绕夹 布伦特里科学 ACS CS 系列 可使用 7 毫米或 9 毫米夹子 异氟醚 中西部兽医供应 193.33161.3 解剖显微镜 徕卡 L2 （二层） 小老鼠鼻锥 Supera 麻醉创新 ACC526 系列 氧气流量计 Supera 麻醉创新 氧660 威尔剪辑去除器 F.S.T. 编号 12033-00 普遍

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