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肾包膜肿瘤异种移植:一种用于评估前列腺癌发生的实验动物模型构建技术

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2023年4月30日

本文内容

摘要

来源:Nicholson, T. M. 等. 肾包膜异种移植与皮下颗粒植入用于评估前列腺癌变及良性前列腺增生。J. Vis. Exp. (2013)

在本视频中,我们展示了将人源前列腺癌组织移植物植入免疫缺陷小鼠肾包膜的技术。该技术可用于评估肿瘤进展并开发新的治疗策略。

方案

所有涉及动物模型的实验步骤均已通过当地机构动物护理委员会和 JoVE 兽医评审委员会的审核。

1. 手术步骤:肾包膜异种移植

  1. 在实施麻醉前,观察小鼠以确保其健康状况良好。
  2. 将小鼠放入异氟烷麻醉诱导室,浓度设为 3-5%。当动物停止活动且呼吸频率降低时,将其转移至俯卧位的鼻罩中,并以 1-3% 的浓度维持麻醉。
  3. 如有必要,使用电推剪剃除小鼠背部毛发。使用裸鼠(athymic nude, nu/nu)时无需剃毛。
  4. 对伸展的后足趾间蹼施加稳固压力,以评估麻醉深度。若小鼠对压力有反应,则需延长麻醉起效时间。必要时可轻微调整麻醉气体流量,以达到充分麻醉状态。
  5. 当小鼠达到充分麻醉后,用外科碘伏(如 Betadine)溶液对术区进行消毒,随后使用 70% 酒精脱碘。
  6. 穿戴无菌手套和手术衣;在手术区域覆盖无菌手术巾。用有齿镊提起背部皮肤,使用粗剪刀沿背侧中线做 2-3 cm 长的切口。
  7. 使用钝头剪刀或探针,将切口下方的真皮层与体壁分离(双侧移植时两侧均分离,单侧移植时仅分离一侧)。
  8. 将小鼠重新置于侧卧位,通过肌肉壁观察肾脏轮廓以定位肾脏。用拇指和食指在腹部施加轻柔的手动压力,有助于可视化内部器官。
  9. 使用精细虹膜剪,注意避开主要血管和脊神经,沿脊柱方向在体壁上做 1 cm 长的切....

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材料

本文使用的材料清单
姓名公司目录编号评论
无菌手术衣中西部兽医供应公司350.79866.2
外科口罩中西部兽医供应公司350.50111.2
无菌手套 Kimberly Clark 55092
反射式伤口剪钳 F.S.T. 12031-09与伤口夹尺寸对应
薇乔缝合线 中西部兽医供应公司295-92100.2 4-0,FS-2,可吸收
直头尖/钝头剪刀 精细科学工具公司(F.S.T.)14054-13
格劳费镊子(带齿、有齿、弯曲)F.S.T.11055-10
异氟烷蒸发器 Supera麻醉创新VAP3000
诱导室 Supera麻醉创新RES644
玻璃巴斯德吸管 Fisher ScientificS670505" 长度
格劳费镊子(带齿、弯型) F.S.T.11052-10
格劳费镊子(带齿,直型)F.S.T.11050-10
聚维酮碘 韦伯斯特兽医07-836-3379
无菌生理盐水Midwest Vet Supply193.74504.3 0.9% 氯化钠注射液
棉签 中西部兽医供应公司001.06220.2
伤口夹 Braintree Scientific 美国化学会化学科学可使用7 mm或9 mm的夹子
异氟烷 中西部兽医供应公司193.33161.3
解剖显微镜 Leica L2
小型小鼠鼻锥 Supera麻醉创新 ACC526
氧气流量计 Supera麻醉创新 OXY660
Would剪切去除剂 F.S.T. 12033-00 通用的

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