组织切片的脱蜡和再水化:从 FFPE 组织载玻片中去除石蜡，然后进行组织再水化的两步程序

摘要

来源:Sugimoto， K. et al.胃肠道癌症中 DNA 甲基化的全基因组分析。J. Vis. Exp.（2020 年）

在本视频中，我们演示了从胃肠道肿瘤组织获得的 FFPE 或福尔马林固定石蜡包埋切片的处理。脱蜡和再水化步骤允许处理组织标本以进行后续分析应用。

方案

所有涉及人类参与者的程序均已按照机构、国家和国际人类福利准则执行，并已由当地机构审查委员会审查。

1. 清洗载玻片

1. 准备 10 μm 未染色的福尔马林固定石蜡包埋 （FFPE） 切片。
2. 将载玻片放在载玻片架中:使用大约 3-5 个最大的横截面载玻片，除非组织最小，并且需要更多载玻片。
3. 用二甲苯填充载玻片架，并确保载玻片上的所有组织都浸没在载玻片上。静置 15 分钟。
4. 15 分钟后，倒出二甲苯，用移液器吸头握住载玻片，以免载玻片脱落。
5. 将更多的二甲苯倒入到与以前相同的水平。再静置 15 分钟。
6. 15 分钟后，再次倒出二甲苯。
7. 用 100% 乙醇 （EtOH） 填充载玻片架，并确保载玻片上的所有组织都完全浸没。静置 3 分钟。
8. 倒出 EtOH，同时小心地握住载玻片。用更多的 EtOH 重新填充到相同的水平。静置 2 分钟。
9. 再次倒出 EtOH 并取下载玻片。小心地将它们面朝上放在干净的纸巾上晾干。静置 10 分钟。

材料