组织切片的脱蜡与复水：一种从FFPE组织切片中去除石蜡并进行组织复水的两步法

摘要

来源：Sugimoto, K. 等. 胃肠道癌症中DNA甲基化的全基因组分析。J. Vis. Exp. (2020)

在本视频中，我们演示了对来自胃肠道肿瘤组织的福尔马林固定石蜡包埋（FFPE）切片的处理过程。脱蜡和再水化步骤可使组织样本适用于后续的分析应用。

方案

所有涉及人类参与者的操作均按照机构、国家和国际的人类福利指南进行，并已通过当地机构审查委员会的审查。

1. 清洗载玻片

1. 准备10 µm厚的未染色福尔马林固定石蜡包埋（FFPE）切片。
2. 将切片放入玻璃切片架中：通常使用3-5张组织横截面积最大的切片，除非组织量极少，此时需使用更多切片。
3. 向切片架中加入二甲苯，确保切片上的所有组织均完全浸没，静置15分钟。
4. 15分钟后，用移液器吸头固定切片，倒出二甲苯，防止切片滑落。
5. 重新加入二甲苯至与之前相同的液面高度，再次静置15分钟。
6. 15分钟后，再次倒出二甲苯。
7. 向切片架中加入100%乙醇（EtOH），确保切片上的所有组织完全浸没，静置3分钟。
8. 小心固定切片，倒出乙醇，然后补充等量的新鲜乙醇至相同液面高度，静置2分钟。
9. 再次倒出乙醇，取出切片，小心地正面朝上放置于洁净的纸巾上晾干，静置10分钟。

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材料

本文使用的材料清单

姓名	公司	目录编号	评论
二甲苯	Sigma-Aldrich	214736
100% 乙醇	Sigma-Aldrich	24194