嵌入外泌体的切片、染色和 TEM 成像:使用 TEM 可视化外泌体结构特征的方案

Abstract

来源:Jung， M. K. et al. 通过透射电子显微镜对外泌体进行样品制备和成像。J. Vis. Exp.（2018 年）

该视频描述了制备包埋外泌体薄片的技术。这些切片可以使用透射电子显微镜 （TEM） 进一步染色和成像，以研究外泌体的结构特征。

Protocol

1. 外泌体的切片

1. 通过将纯化的外泌体样品（从 HCT116 细胞的培养上清液获得）包埋在纯低粘度包埋混合物中来制备外泌体阻断。
2. 通过超薄切片机将外泌体块切成 60 nm 厚的切片。
3. 用 2% 乙酸铀酰双染 20 分钟，柠檬酸铅双染 10 分钟。
   对于雷诺铅溶液，将 1.33 g 硝酸铅和 1.76 g 柠檬酸钠加入总共 50 mL 蒸馏水中。
4. 在 80 kV 的透射电子显微镜下观察网格。
5. 单击"获取"，然后在 80 kV 电子显微镜下的 CCD 相机系统中单击"文件"和"另存为"。遵循曝光时间的自动设置。

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Materials