小鼠尿液清除与膀胱冲洗模型：一种基于导管技术的小鼠膀胱排空与冲洗操作方法 关键词：小鼠，膀胱，尿液清除，膀胱冲洗，导管，泌尿系统模型

摘要

来源：Yu, C. 等 通过电穿孔将质粒DNA递送至小鼠膀胱尿路上皮的新方法。J. Vis. Exp. (2018)

在本视频中，我们介绍了一种基于导管的技术，用于排空并冲洗小鼠模型的膀胱。经过处理的小鼠可进一步用于其他实验操作。

方案

所有涉及动物模型的操作均已通过当地机构动物护理委员会和 JoVE 兽医审查委员会的审核。

 1. 动物麻醉

1. 使用台式麻醉系统以异氟烷麻醉动物。打开氧气₂ 储气罐并调节氧气流量计至1 L/min。
2. 将一只成年雌性C57BL/6J小鼠放入诱导室中。打开异氟烷挥发罐并调节浓度至3%，用于诱导麻醉。小鼠应在2分钟内进入麻醉状态。 从小鼠取出诱导室时，皮下注射丁丙诺啡镇痛剂（0.1 mg/kg）以进行预先镇痛。
   注意： 本方案使用雌性小鼠，因其在尿道插管过程中更易操作。该方案同样适用于雄性小鼠，但需格外谨慎。
3. 为动物眼部涂抹眼药膏以防止干燥。将麻醉后的小鼠仰卧置于加热垫上，使其鼻部进入鼻罩。打开空气回路开关，使异氟烷通过鼻罩输送。
4. 用胶带固定头部和鼻罩。将异氟烷挥发罐调节至2%以维持麻醉。
5. 用胶带固定动物四肢，进行足趾夹捏测试以确认动物处于深度麻醉状态，随后剃除腹部区域的毛发。

2. 尿液清除与膀胱冲洗

1. 将润滑剂涂抹在导管（24G，长度为2.11 cm，外径为0.045 cm）上，确保其外表面完全覆盖。
2. 将导管插入尿道口，并缓慢推进直至进入膀胱，此时尿液应通过导管流出。轻轻按压腹部以帮助排空尿液。
   1. 通过观察尿液是否自动流出，检查导管是否正确插入膀胱。避免刺穿尿道或膀胱壁，必要时可多次涂抹润滑剂。
3. 用移液器将尿液弃入废液杯中。
4. 将80 µL磷酸盐缓冲液（PBS）通过移液器加入导管的外端，此时导管的另一端仍位于膀胱内。小心地将1 mL注射器连接至导管，轻柔推动注射器，将PBS注入膀胱。保留部分PBS在导管内，以避免在膀胱中产生气泡。
5. 取下注射器，等待PBS从膀胱排出。轻轻按压腹部以排空PBS。
6. 用移液器将导管内的PBS弃入废液杯中。
7. 重复PBS冲洗步骤（步骤2.4至2.6）两次。
   注意：在这些冲洗步骤中操作务必轻柔。若导管中出现血液或液体无法自动流出，通常提示尿道已被刺穿。

材料

本文使用的材料清单

姓名	公司	目录编号	评论
BD 1 mL TB 注射器	Fisher	148232E
Exel International 一次性安全留置针（I.V. 导管）	Fisher Scientific	14-841-21	24G，长度 2.11 cm，外径 0.045 cm
K&H 小动物加热静卧垫，9 英寸 × 12 英寸	Amazon		用纸巾覆盖加热垫
眼科软膏	Fisher	NC0849514
PBS，pH 7.4	Life Technologies	10010049
移液器吸头 200 µL	USA Scientific	1111-0206
眼科软膏	Fisher	NC0849514
移液器吸头，通用型；0.1 至 10 µL	Fisher	02707438(CS)
Buprenorphine	Sigma	B9275-50MG
PIPETMAN NEO P2	Gilson	F144561
PIPETMAN NEO P200N	Gilson	F144565
Therio-gel 兽用润滑剂	PBS animal health	353-736
V-1 台式麻醉系统	VetEquip	901806
Isoflurane	Vet one	501017
Scotch 透明胶带	Fisher	19047257