来源:Woodard, L. E. 等. 通过水动力肾盂注射实现肾脏中蛋白质的非病毒表达。J. Vis. Exp. (2018)
在本视频中,我们介绍了将质粒通过水动力注射法导入小鼠肾脏肾盂以实现核酸转染的实验方案。该技术利用高静水压的原理,可在不造成组织损伤的情况下,将质粒强制导入特定器官部位,实现器官特异性的质粒递送。
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2023年4月30日
来源:Woodard, L. E. 等. 通过水动力肾盂注射实现肾脏中蛋白质的非病毒表达。J. Vis. Exp. (2018)
在本视频中,我们介绍了将质粒通过水动力注射法导入小鼠肾脏肾盂以实现核酸转染的实验方案。该技术利用高静水压的原理,可在不造成组织损伤的情况下,将质粒强制导入特定器官部位,实现器官特异性的质粒递送。
所有涉及动物模型的操作均已被当地机构动物护理委员会和 JoVE 兽医审查委员会审核。
1. 进行水动力肾盂注射手术
2. 准备小鼠和DNA注射器以进行手术
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图 1. 水动力肾盂注射的正确切口位置和针头放置。A) 切口(红线)应位于小鼠脊柱约 1 cm 处,并在肋骨下方约 1 cm 处。 B) 通过侧腹切口暴露肾脏后,肾盂应位于肾脏中段,呈微黄透明/白色小点。注射时应避免扰动肾静脉、肾动脉或输尿管。胰岛素注射器的针头如图所示直接插入肾盂,深度约为 0.5 cm,并在 2–3 秒内快速推注。
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| 姓名 | 公司 | 目录编号 | 评论 |
|---|---|---|---|
| AnaSed 赛拉嗪 | 帕特森兽医公司 | 07-808-1947 | 麻醉剂 - 非管制物质 |
| BD 胰岛素注射器 0.5 mL 29G 1/2 英寸 | 卡地纳健康公司 | 309306 | 所需注射器 |
| Buprenex | 药剂师/兽医 | 镇痛剂 - 管制药品 | |
| 超精细显微解剖剪 | 罗博兹外科器械公司 | RS-5882 | 外科工具 |
| Gaymar 加热泵 | 帕拉贡医疗公司 | TP-700 | 循环水加热泵 |
| Germinator 500 | 罗博兹外科器械公司 | DS-401 | 用于手术过程中重复使用外科器械 |
| Graefe 镊子 | 罗博兹外科器械公司 | RS-5136 | 外科工具 |
| Graefe 组织镊 | 罗博兹外科器械公司 | RS-5153 | 外科工具 |
| Halsey 持针器,5" 长度 | 罗博兹外科器械公司 | RS-7841 | 外科工具 |
| 加热垫 - 15" x 21" - 至少需要3个 | 帕拉贡医疗公司 | TP22G | 与 Gaymar 加热泵配合使用 |
| 氯胺酮 | 药剂师/兽医 | 麻醉剂 - 管制药品 | |
| Prevantics 消毒棉片 | 赛默飞世尔科技公司 | 23-100-110 | 用于皮肤手术准备 |
| Prolene 5-0 缝线 锥形针 30" | 赛默飞世尔科技公司 | NC0256891 | 皮肤用不可吸收缝线 |
| Puralube 品牌眼用软膏 | 帕特森兽医公司 | 07-888-2572 | 用于保持手术期间眼睛湿润 |
| Vicryl 5-0 缝线 J303H | 赛默飞世尔科技公司 | NC9816710 | 肌肉层用可吸收缝线 |
| Wahl Mini Arco 电推剪 | Med-Vet 国际公司 | I 8787-1550 | 用于皮肤准备的剃毛器 |