荧光引导的肿瘤切除与间充质干细胞接种支架植入小鼠模型：一种将治疗性间充质干细胞递送至小鼠脑肿瘤切除腔的外科手术方法

摘要

来源：Sheets, K. T. 等. 基于影像引导的胶质母细胞瘤切除及治疗性干细胞接种支架颅内植入。 J. Vis. Exp. (2018)

本视频展示了用于影像引导下肿瘤切除及植入经基因工程改造、表达肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）的间充质干细胞（MSCs）的生物支架的外科手术操作。这类治疗性间充质干细胞在脑肿瘤治疗中具有潜在应用价值。

方案

所有涉及动物模型的操作均已通过当地机构动物护理委员会和 JoVE 兽医审查委员会的审核。

1. 荧光引导切除与支架植入

注意：手术开始前需对所有工具进行灭菌处理。

1. 将立体定位仪放置在荧光解剖显微镜的载物台上。
2. 在诱导室中使用吸入式异氟烷对小鼠进行麻醉。麻醉后，通过异氟烷鼻罩适配器将小鼠固定在立体定位仪上，并持续供给吸入麻醉气体。使用加热垫和/或体温探头维持小鼠体温。
   注意： 4–5% 异氟烷适用于诱导麻醉，2–3% 适用于维持麻醉，但需根据每只小鼠的具体情况调整并密切监测。
3. 在眼睛上涂抹眼用软膏，防止角膜干燥。使用三轮酒精棉片和三轮聚维酮碘棉片交替擦拭消毒头皮切口部位。
4. 对每条肢体进行足趾夹捏反射测试，确认无反应以确保麻醉充分。维持稳定的呼吸频率，约为 55–65 次/分钟。
5. 使用镊子夹起并轻轻提起头皮，用手术剪沿中线做一条前后方向的直线切口。用 PBS 冲洗切口区域，并以棉签头采用环形刷拭动作清除皮下脂肪。调整皮肤位置，使先前建立的颅窗完全暴露可见。
6. 使用 18G 针头在颅窗边界内侧轻轻穿刺硬脑膜。重复操作，直至切口完整沿颅窗内缘走行。
7. 使用精细镊子将硬脑膜剥离移....

材料

本文使用的材料清单

姓名	公司	目录编号	评论
仅用于小鼠立体定位仪	Stoelting	51730	在手术期间保持头部稳定定位
荧光解剖立体显微镜	Leica	M165 FC	可在肿瘤切除过程中实现实时成像
Vetbond 组织粘合剂	3M	1469	用于闭合皮肤伤口的外科胶水
人工泪液	Akorn	664268	防止手术期间眼睛干涩
Webcol 酒精消毒棉签	Covidien	6818	消毒切口部位
聚维酮碘外科洗手液	Purdue Fredick Company	6761815117	消毒切口部位
棉签	Fisherbrand	23-400-115	手术工具
E-vac 吸引系统	Argos	EV310	用于切除肿瘤的真空抽吸泵
从即用型 TISSEEL 中提取的纤维蛋白原和凝血酶	Baxter		用于暂时固定切除腔内的支架