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成年小鼠腭组织解剖:一种从成年小鼠口腔内获取硬腭与软腭的手术操作方法

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2025年7月8日

本文内容

摘要

来源:Xuan Ngo, Y. 等。从小鼠成年腭部分离与培养原代口腔角质形成细胞。J. Vis. Exp. (2021)

本视频展示了一种从小鼠模型中分离腭部组织的外科手术操作。

方案

所有涉及动物模型的操作均已经过当地机构动物护理委员会和 JoVE 兽医审查委员会审核。

1. 成年小鼠腭组织的解剖

  1. 根据机构有关动物福利的规定,通过颈椎脱位法处死一只成年C57BL/6J小鼠(雄性或雌性均可)。
    1. 使用剃毛器去除口周毛发。用剪刀从两侧脸颊向颌部剪开。
      注意:小鼠在处死前需进行麻醉。使用甲苯噻嗪、咪达唑仑和丁丙诺啡的麻醉混合物(见材料表)。
  2. 使用镊子将小鼠口腔充分打开,并用棉签吸除血液。用含10%聚维酮碘的棉签擦拭口腔内部,以消毒腭部。
  3. 为获取小鼠腭组织,首先使用外科手术刀片沿上颌牙齿的腭侧做全层边缘切口。然后使用骨膜剥离器小心分离整个腭部组织。
    注意:骨膜剥离器是一种用于掀起黏骨膜瓣的工具(见材料表)(图1B)。
  4. 迅速将腭组织转移至含有4 mL完全培养基加抗生素-抗真菌溶液的15 mL离心管中。将组织置于冰上保存,直至准备进行孵育。
    注意:若从多只小鼠收集组织,腭组织可在冰上保存最多4小时。

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结果

小鼠腭部解剖示意图、工具图像、软腭组织、上皮细胞分离过程。
图1:小鼠口腔角质形成细胞的解剖步骤及分离流程概览。(A)小鼠口腔的示意图。(B)用于解剖腭部并分离小鼠口腔角质形成细胞的器械。(C)小鼠腭部的明场图像。比例尺:100 µm。(D)实验方案总结。

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材料

本文使用的材料清单
姓名公司目录编号评论
虹膜剪Muromachi Kikai14090-09
美托咪定Nippon Zenyaku KogyoDomitor
咪达唑仑Astellas PharmaDormicum
No.15 一次性手术刀Feather219AABZX00136000
布托啡诺Meiji Seika PharmaVetorphale
半弯镊BRC Bio Research CenterPRI13-3376
聚维酮碘Y's Square872612
刮匙 #14AS ONE8-4599-01
精细镊BRC Bio Research CenterPRI13-3374
抗生素-抗真菌剂 100xGibco15240062
15 mL 无菌锥形管Falcon352096
棉AS ONE63-1452-97
EpiLife 定义型生长添加剂 (EDGS) Gibco S0120

标签

腭组织解剖硬腭采集软腭分离小鼠模型手术口腔腔隙操作小鼠腭部提取组织收获技术手术切口方法组织转移方案污染预防培养基