基于高频超声成像的早期妊娠表征技术：用于研究妊娠小鼠模型中胚胎着床及妊娠进展的方法

摘要

来源：Peavey, M. C. 等。三维高频超声成像在小鼠早期妊娠表征中的新应用。J. Vis. Exp. (2017)

在本视频中，我们展示了利用高频超声成像技术对妊娠小鼠模型中的胚胎着床部位进行成像。该成像技术可成功检测出可存活的妊娠，并在小鼠早期妊娠期间对胚胎着床部位进行表征。

方案

所有涉及动物模型的操作均已通过当地机构动物护理委员会和 JoVE 兽医审查委员会的审核。

1. 孕鼠成像

1. 将小鼠仰卧位放置于监测平台上。通过鼻罩持续向小鼠输送异氟烷麻醉剂（浓度为1.5–2.5%）和氧气（1 L/min）。用胶带轻轻将四肢固定在平台的心率监测垫上。
   1. 在腹部涂抹1–2 mL超声传导凝胶。
2. 使用手动电机载物台，将超声探头置于下腹部。
   1. 找到膀胱，其应表现为位于阴道开口头侧的一个充满液体的暗色圆形结构。
   2. 确定膀胱位置后，将探头极缓慢地向头侧移动，以观察妊娠子宫。妊娠子宫应呈圆柱形，并在妊娠部位出现圆形区域，外观类似“一串珍珠”。
   3. 确认妊娠子宫后，开始进行二维成像。

2. 二维超声成像（图1）

1. 确定妊娠子宫后，从最靠近膀胱的妊娠部位开始，缓慢且依次向头侧移动，以确定妊娠部位的数量和位置。
2. 若观察到肾脏、脾脏或肝脏，则需将探头向尾侧（即更靠近膀胱的方向）重新定位，表明操作者已过度向头侧移动。
3. 以相同方式对侧子宫角进行成像。
4. 当超声图像帧位于着床/妊娠部位中心时，冻结图像以便后续分析和测量。
   注意：图像冻结并保存以供后续分析所需时间少于1秒。
5. 使用高回声蜕膜化反应作为标记，测量着床间距。首先手动点击“测量”工具，然后点击一个着床部位的位置；接着将光标拖动至下一个着床部位并点击，绘制一条线，计算机将自动报告其距离。软件随后会显示该手动测量结果。此步骤非自动化，依赖操作者通过在蜕膜化部位之间画线，手动标记间距，程序将提供相应测量值。
6. 测量着床大小、孕囊大小以及胎芽大小。

结果

图 1：高频超声检测着床部位发育及整个妊娠期间胎儿生长的监测。 如图 1A所示，在交配后 5.5 天（5.5 d.p.c.），回声较强的蜕膜化子宫内膜（D）呈较亮区域，可据此定量分析着床部位的数量及其分布间距。如图 1B所示，另一侧子宫角中的蜕膜化部位（D）与子宫角（U）相连。至交配后 7.5 天（7.5 d.p.c.），回声较弱的暗区孕囊（GS）及胎儿极（F）已清晰可辨，见图 1C。

材料

本文使用的材料清单

姓名	公司	目录编号	评论
VisualSonics Vevo 2100 超声成像平台/仪器 	VisualSonics, inc. 	VS-11945
Vevo 成像工作站 	VisualSonics, inc.	SA-11982
Aquasonic 100 超声传导凝胶  	Parker	#SKU PLI 01-08
异氟烷（IsoThesia）100 mL 瓶装  	Henry Shein	#29404
PuraLubenAnimal 眼科软膏 	Dechra	 #12920060