劳力性热射病小鼠模型：研究劳力性热射病潜在机制的实验方案

摘要

来源：King, M. A. 等. 小鼠运动性热射病的临床前模型. J. Vis. Exp. (2021).

在本视频中，我们描述了一种在小鼠模型中研究劳力性热射病（EHS）的逐步实验方案。

方案

所有涉及动物模型的操作均已经过当地机构动物护理委员会和 JoVE 兽医审查委员会的审核。

1. 环境、健康与安全规程

1. 在进行EHS实验方案的前一晚，将小鼠放入环境舱中，在室温（约25 °C，相对湿度≈30%）下适应环境。
2. 使用数据采集系统连续记录核心体温（Tc），每30秒取一次平均值，整夜持续记录。
3. 在EHS实验当天早晨，确保小鼠的核心体温处于或低于正常的昼夜节律温度范围（即36–37.5 °C），然后再升高环境舱温度。这可确保小鼠无发热症状 且在此期间未遭受过度应激。
4. 当小鼠核心体温稳定在正常静息范围内后，移除食物和饮水，并称量动物体重。关闭舱门，将环境舱温度升至目标温度37.5 °C、相对湿度40%–50%，或设定为所需的环境温湿度。使用经过校准的温湿度监测仪验证舱内温湿度。
5. 用遮光帘围绕环境舱，以在实验过程中尽量减少光照和干扰。通过远程红外照明摄像头持续监测小鼠状态。将第二个摄像头对准放置在跑轮附近的温湿度监测仪。根据需要调整环境舱控制器的设定点，确保动物附近区域的温度读数准确。
6. 当第二个摄像头显示环境舱已达到目标温度（通常需要约30分钟）时，迅速打开舱门，将小鼠放入强制跑轮中。
7. 启动强制跑轮实验程序，初始速度为2.5 m/min，之后每10分钟增加0.3 m/min，直至小鼠核心体温达到41 °C。一旦小鼠达到该核心体温，保持速度恒定，直到出现症状限制终点，表现为明显意识丧失、向后跌倒或晕厥，以及无法继续奔跑或抓握跑轮。当小鼠在跑轮上连续发生三次无反应性向后旋转时，确认该时间点。或者，根据当地IACUC规定确定人道终点（例如当Tc ~43 °C时），以决定何时终止实验。该终点在几乎所有小鼠中均略高于症状限制点。
8. 若执行快速降温方案（R），一旦小鼠达到症状限制终点，立即停止跑轮运转，并迅速将其从强制跑轮中取出。称量小鼠体重后，将其放回原有笼具，在室温下恢复。在此期间，保持舱门开启 并将培养箱设定点调回室温，使舱体快速降温。该操作可实现>99%的长期存活率。

材料

本文使用的材料清单

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