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胆道系统树脂铸造:一种使用不透射线树脂注射分析小鼠模型中胆道系统 3D 结构的技术

2025年7月8日

本文内容

摘要

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来源:Hankeova， S. et al. DUCT: 双树脂铸造，然后进行显微计算机断层扫描进行 3D 肝脏分析。J. Vis. Exp.（2021 年）

该视频介绍了胆道系统树脂浇注的过程，用于了解 3D 胆道结构。该技术提供了对胆道系统内径和网络连接的见解，可用于肝脏再生分析。

方案

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所有涉及动物模型的程序均已由当地机构动物护理委员会和 JoVE 兽医审查委员会审查。

1. 双树脂注射

  1. 制备
    1. 制备树脂溶液。对于双系统树脂注射，请按照步骤 1.1.2-1.1.4 中的说明准备黄色和绿色树脂。
    2. 每只小鼠制备 1 mL 等分试样的稀释树脂。
    3. 黄色树脂:用透明稀释剂以 3:1 的比例稀释黄色硅橡胶（高不透射线），制备用于注射的黄色树脂。
    4. 绿色树脂:将蓝色硅橡胶（检测不到的不透射线）与透明稀释剂以 1:1 的比例混合，制备蓝色树脂。要生成绿色树脂，请将稀释的蓝色树脂与稀释的黄色树脂以 1:1 的比例混合。彻底涡旋绿色树脂，直到颜色均匀。
      注意:蓝色树脂具有非常低的不透射线，microCT 无法检测到，因此需要用黄色树脂稀释，以产生两种具有不同放射光性的树脂。
      谨慎:树脂可能含有致癌物铬酸铅。它在火中产生有毒气体。小心处理并将树脂作为危险废物处理。
    5. 按照步骤 1.1.6-1.1.11.
      中所述，准备两个带管道的进样组（进样组 #1 和进样组 #2） 注意:对于成年小鼠 （>P30（出生后第 30 天）= P30 - 2 ....

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结果

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图 1:用于树脂浇注的注射套件。（A） 注射套件 #1 包括一个 30 G 针头和长 ~30 cm 的 PE10 管。注射套件 #2 由 23 G 针头和 ~30 cm 长的 PE50 管组成。（B） 将管子的尖端拉伸并以一定角度切割，以形成斜面尖端。A 和 B 中的标尺是厘米标尺，主要增量为 1 厘米，中间增量为 5 毫米，次要增量为 1 毫米。

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图 2:双树脂铸造流程图。（A） 示意图显示小鼠静脉循环系统和心脏，突.......

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材料

<表格border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"> 本文使用的材料清单 姓名 公司 目录编号 评论 1.5 mL SafeSeal 微量管 萨斯泰特 72.706 元 23 G 带管式蝶形针 BD生物科学 367283 23 G 针 BD生物科学 305892 30 G 针头 BD生物科学 305106 琼脂 糖 顶部生物 P045 苯甲醇 西格玛·奥尔德里奇 108006 苯甲酸苄酯 西格玛·奥尔德里奇 B6630 系列 康宁 50 mL 试管 西格玛·奥尔德里奇 CLS430829-500EA 聚丙烯 棉签 Medicarier 医疗保险 60406 解剖显微镜 徕卡相机股份公司 徕卡 M60 Dulbecco 磷酸盐缓冲盐水 赛默飞世尔科技 14190144 乙醇 70% VWR 编号 83801.41 Falcon 管 15 mL Verkon 电话:331.850.084.006 镊子弯曲 精细科学工具 邮编 11051-10 Fine Graefe 10 cm 弯曲 直镊子 精细科学工具 11050-10 细 Graefe 10 cm 直 甲醛溶液 西格玛·奥尔德里奇 F8775 Hanks 平衡盐溶液 赛默飞世尔科技 14025092 肝素 利奥制药 B01AB01 5000 IE/毫升 Isolfurane 巴克斯特 FDG9623 甲醇 赛默飞世尔科技 11413413 微滤 流泰科技 MV-122 型 合成树脂 黄色 微滤 流泰科技 MV-120 系列 合成树脂 蓝色 微滤 流泰科技 MV 稀释剂 透明树脂稀释剂 巴斯德移液管 Verkon 电话:130.690.424.503 蠕动泵 阿格索斯 010.6131.M20 摇杆 VWR 邮编 444-0142 蚕丝缝合线 阿格索斯 14757 黑丝，4-0，无菌，100 米 皮肤剪刀 精细科学工具 编号 14058-09 虹膜直尖 9 cm 弹簧剪刀 精细科学工具 15000-03 元 Vannas micro，直头 2 mm 注射器 1 mL 鲁尔接头 BD生物科学 303172 管 PE10 BD生物科学 427401 管材 PE50 BD生物科学 427411

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