小鼠模型中的光血栓形成中风建模:光敏染料给药后通过小鼠颅骨的激光照明技术诱导光血栓形成

摘要

来源:Llovera， G. 等人 小鼠中风建模:光血栓形成的局灶性皮质病变。J. Vis. Exp. （2021 年）

该视频演示了在施用光敏染料后，通过激光照射完整颅骨在小鼠模型中产生光血栓性中风的程序。

方案

所有涉及动物模型的程序均已由当地机构动物护理委员会和 JoVE 兽医审查委员会审查。

1. 动物的准备

1. 手术前 30 分钟注射镇痛剂（4 mg/kg 卡洛芬和 0.1 mg/kg 丁丙诺啡）。
2. 记录小鼠体重以调整要注射的 Rose Bengal 的剂量（10 μL/g，即 100 μg/g）。
3. 将鼠标置于异氟醚流速为 4% 的诱导室中麻醉，直到身体和弧菌的自发运动停止。
4. 将鼠标转移到立体定向框架中，并将其置于俯卧位置，将鼻子插入麻醉面罩。固定动物并将异氟醚浓度维持在 4% 1 分钟。然后降低并保持异氟醚浓度为 2%。
5. 轻轻插入直肠探头以监测整个手术过程中的温度。设置相关的反馈控制加热垫，将鼠标体温保持在 37 °C。
6. 将右泛醇眼膏涂抹在双眼上，并用消毒剂清洁皮肤和周围的皮毛。

2. 光血栓形成模型

1. 做一个 2.0-2.5 厘米的纵向切口并缩回以露出头骨。进行一次颅骨暴露，以避免伤口并发症。
2. 用棉花轻轻去除骨膜并确定冠状缝合线。
3. 戴上防护眼镜，打开 561 nm 激光器，向左标记 +3 mm 前囟。
4. 关闭激光，在上述标记坐标处贴上带有 4 毫米直径孔的贴纸。
腹
5. 膜内注射孟加拉玫瑰 （10 μL/g） 给小鼠。将激光束放在距离颅骨 4-5 厘米处，打开 561 nm 激光并照亮颅骨 20 分钟。
6. 在颅骨上滴两滴 0.9% 盐水以补充水分，缝合伤口，并将动物置于 37 °C 的恢复室中以从麻醉中恢复。1 小时后，将小鼠放回温控室中的笼子中。
7. 手术后3天每12小时注射镇痛剂（4 mg / kg卡洛芬和0.1 mg / kg丁丙诺啡）。

材料