新生小鼠心尖切除模型：一种通过手术切除心室心尖以研究新生小鼠心脏再生潜能的外科操作方法

摘要

来源：Li, Y. 等. 新生小鼠心脏巨噬细胞移植至成年小鼠。J. Vis. Exp. (2021)。

在本视频中，我们演示了手术切除新生小鼠心脏左心室心尖的步骤。

方案

所有涉及动物模型的操作均已通过当地机构动物护理委员会和 JoVE 兽医审查委员会的审核。

1. 出生1天的 Cx3cr1 ^GFP/+ 小鼠（C57BL/6 背景）的顶端切除手术

1. 麻醉
   1. 将所有小鼠幼崽从笼中取出，放入一个干净干燥的盒子中。
   2. 将每只小鼠幼崽置于冰中约2-3分钟。确保冰与小鼠幼崽之间有乳胶或纱布等薄层屏障，以防止 冻伤。 
   3. 通过观察以下体征判断麻醉是否充分：皮肤苍白、四肢无活动、足底反射消失。
2. 开胸术
   1. 将青铜手术平台在-20 °C预冷过夜，以帮助维持麻醉状态。
   2. 将已麻醉的小鼠从冰盒中取出，放置于青铜手术平台上，并用医用胶带将其以仰卧位固定在平台上。
   3. 将带有小鼠的手术平台置于体视显微镜下。
   4. 使用浸有聚维酮碘和70%酒精的消毒垫对小鼠胸部进行消毒，或按照机构规定执行。
   5. 在胸腔第四肋间隙处做1 cm皮肤切口，随后使用显微外科剪分离肋间肌，直至暴露心脏。
   6. 借助两把镊子交替轻压胸部和腹部，使心脏无机械损伤地外翻出胸腔。
   7. 将小切口上下方的肋骨作为自然固定装置，以固定心脏位置。
3. 心室心尖切除
   1. 定位左心室心尖部位。在体视显微镜下使用虹膜剪切除直径约1 mm的心室心尖组织。
   2. 确认左心室腔已暴露并开始渗血。
   3. 使用棉签轻轻将心脏推回胸腔内。
   4. 使用8-0 Prolene缝线缝合肌肉、肋骨和皮肤。
   5. 术后彻底清洁小鼠。
4. 术后护理
   1. 术后立即将小鼠从手术平台转移至37 °C加热毯上，以迅速恢复体温。
   2. 通过观察以下体征确认小鼠苏醒：自主呼吸恢复、皮肤颜色由苍白转为粉红、四肢出现活动。
   3. 待小鼠恢复后，将其送回母鼠身边。
   4. 如有必要，可将手术后的小鼠与其母鼠的筑巢材料混合放置。
      注意：重要的是应一次性将所有出生1天的幼崽从母鼠身边移开，并在所有幼崽均恢复后一次性全部归还。

材料

本文使用的材料清单

姓名	公司	目录编号	评论
新生小鼠心脏解离试剂盒	Miltenyi Bio Tech, Teterow, Germany	130-098-373