激光多普勒探针定位技术：在小鼠模型中将探针植入大脑中动脉以测量血流量的方法

摘要

来源：Llovera, G.，等。小鼠卒中模型：通过颈外动脉进行短暂性大脑中动脉阻塞。J. Vis. Exp. (2021)。

本视频介绍了将激光多普勒探头固定在小鼠大脑中动脉（MCA）上的手术操作。该探头通过检测红细胞在动脉内运动所引起的多普勒频移，来测量脑部微血管中的血流情况。

方案

所有涉及动物模型的操作均已被当地机构动物护理委员会和 JoVE 兽医审查委员会审核。

1. 激光多普勒仪的准备与定位

1. 通过截取10 µL移液枪头的尖端（3-5 mm长度），制备用于固定激光多普勒探头的支架。
   注意： 所有器械均使用热珠灭菌器进行灭菌。手术前后均使用微生物消毒喷雾对表面进行消毒。手术前，使用伤口消毒喷雾对小鼠头部和胸部周围区域进行消毒。
2. 术前30分钟对小鼠注射镇痛剂（卡洛芬4 mg/kg，布托啡诺0.1 mg/kg，腹腔注射）。
3. 将小鼠置于诱导室中，以4%异氟烷气流麻醉，直至其自发身体运动和触须活动停止。
4. 将小鼠俯卧位放置于手术区域，鼻部置于麻醉面罩中。维持异氟烷浓度为4%持续一分钟，随后降低并维持在2%。
5. 设置配套的反馈控制加热垫，以维持小鼠体温在37 °C，并轻柔插入直肠探头，全程监测手术期间体温。
6. 在双眼上涂抹右泛醇眼膏。
7. 使用70%乙醇对左眼和左耳周围的皮肤及毛发进行消毒。
8. 在左眼与左耳之间切开头皮（长约1 cm），暴露颅骨。
9. 切开并牵开颞肌，以显露颅骨下方的中脑动脉（MCA）。
10. 使用胶水将固定激光多普勒探头/光纤的支架外端固定于左侧中脑动....

材料

本文使用的材料清单

姓名	公司	目录编号	评论
45° 斜坡	H&S Kunststofftechnik		高度：18 cm
5 mL 注射器	Braun
异氟烷麻醉系统	Drager
Bepanthen 软膏	Bayer
C57Bl/6J 小鼠	Charles River	000664
70% 乙醇	CLN Chemikalien Laborbedorf	521005
96% 乙醇	CLN Chemikalien Laborbedorf	522078
99% 乙醇	CLN Chemikalien Laborbedorf	ETO-5000-99-1
线栓	Doccol	602112PK5Re
精细 45° 角镊子	FST	11251-35
精细镊子	FST	11252-23
精细剪刀	FST	14094-11
胶水	Orechseln	BSI-112
胶水固化剂	Drechseln & Mehr	BSI-151
加热垫	FHC DC Temperature Controller
异氟烷	Abbot	B506
激光多普勒仪	Perimed	PF 5010 LDPM, Periflux System 5000
激光多普勒探头	Perimed	91-00123