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小鼠腰椎不稳模型的外科诱导:小鼠腰椎棘突及其连接韧带切除手术操作

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2025年7月8日

本文内容

摘要

来源:Liu, S. 等。腰椎不稳的小鼠模型J. Vis. Exp. (2021)

在本视频中,我们描述了一种通过切除腰椎L3至L5棘突以及棘上韧带和棘间韧带,在小鼠模型中诱导腰椎不稳的手术方法。

方案

所有涉及动物模型的操作均已通过当地机构动物护理委员会和 JoVE 兽医审查委员会的审核。

1. 术前准备

  1. 器械灭菌:手术前将手术器械放入高压灭菌器中进行蒸汽灭菌(121 °C,15 分钟)。将器械装入金属容器中,并保持无菌状态直至手术使用。
  2. 手术平台设置:分配至少 60 cm × 60 cm 的台面区域用于手术操作。用 75% 酒精清洁台面,并覆盖一次性医用毛巾。在台面上部 1/3 区域放置无菌手术器械包、试剂和手术用品。剩余 2/3 区域保持洁净,用于手术操作。在手术垫下方添加加热垫以提供保温支持。
  3. 动物准备
    1. 将动物(C57BL/6J 小鼠,雄性,8 周龄)放入诱导室中。开启麻醉蒸发器,异氟烷浓度设为 4%,氧气流速为 4 L/min 进行诱导麻醉。动物完全麻醉后,通过鼻罩维持麻醉,术中异氟烷浓度为 1.5%,氧气流速为 0.4 L/min。术中持续监测动物呼吸情况。
    2. 涂抹盐酸氯四环素眼膏,防止手术期间角膜干燥。
    3. 使用小型动物修剪器,剃除小鼠背部从下胸部至骶部顶端的手术区域毛发。用纸巾擦拭去除剃除的毛发。
    4. 在剃毛区域涂抹脱毛膏,停留时间不超过 3 分钟。用纱布擦去脱毛膏,并用 2 mL 0.9% 无菌生理盐水冲洗。
    5. 在小鼠腹部下方放置定制的圆柱形手术垫(图 1A),以抬高腰椎,便于手术操作。

2. 暴露腰椎第三至腰椎第五(L3–L5)棘突

  1. 用食指触诊腰椎的皮下棘突,其位置相对更偏外侧,并与胸椎和骶椎进行比较,以确定腰椎区域。
  2. 使用75%酒精清洗皮肤。用手术刀片在腰部区域沿中线做一长度为3–4 cm的切口,从胸中段延伸至髋部,以暴露筋膜。
  3. 通过附着于棘突尖端的后侧筋膜形态来识别腰椎。具体而言,第三腰椎(L3)至第一骶椎(S1)的筋膜因其呈“V”形而与其他筋膜相区别。最后一个“V”形尖端连接第一骶椎(S1)筋膜,第一个“V”形尖端对应于L3棘突(图1B)。
  4. 用手术刀片在两侧沿L3至L5棘突外侧做后侧椎旁肌切口(图1C)。控制切口深度至关节突水平,以减少出血。
  5. 使用两把眼科镊子分离肌肉层,暴露L3至L5的棘突及棘上韧带。

3. 切除第3至第5腰椎棘突及其附着韧带

  1. 使用维纳斯剪刀切断棘间韧带,分离各个棘突(图1D)。
  2. 使用维纳斯剪刀将L3–L5棘突连同棘间韧带一并切除(图1E)。
  3. 用无菌编织丝线(缝线规格5.0)缝合皮肤切口,无需重新附着椎旁肌。
  4. 在手术部位涂抹盐酸氯四环素眼膏。

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结果

啮齿类动物L3-L5脊柱检查;手术操作,解剖标记;五图面板研究。
图1: L3–L5棘突暴露及LSI手术操作。A)将定制的圆柱形垫片置于小鼠腹部下方。(B)暴露腰筋膜,并通过“V”形结构识别L3至S1棘突。(C)在L3至L5棘突两侧作外侧椎旁肌切口。(D)切断棘间韧带,逐个暴露棘突。(E)切除L3–L5棘突及其间的棘间韧带和棘上韧带。

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材料

本文使用的材料清单
姓名公司目录编号评论
盐酸金霉素眼膏上海通用药业股份有限公司H31021931预防眼部干燥,预防伤口感染
C57BL/6J 雄性小鼠天江药业有限公司(江苏,中国)SCXK2018-0004动物模型
一次性医用垫巾河南华昱医疗器械有限公司20160090手术操作平台
吸入式麻醉设备MIDMARKMatrx 3000麻醉
异氟烷深圳瑞沃德生命科技有限公司1903715麻醉
盐酸利多卡因山东华鲁制药有限公司H37022839镇痛
医用缝合针上海浦东金环医疗用品有限公司20S0401J缝合皮肤
眼科镊上海医疗器械(集团)有限公司手术器械厂JD1050夹持皮肤
眼科剪刀(10 cm)上海医疗器械(集团)有限公司手术器械厂Y00030皮肤切口
编织丝线上海浦东金环医疗用品有限公司11V0820缝合皮肤
小型动物剃毛器上海飞科电器有限公司FC5910脱毛
无菌手术刀片(12#)上海浦东金环医疗用品有限公司35T0707肌肉切口
薇婷脱毛膏利洁时家化(印度)有限公司NA脱毛
维纳斯剪刀明仁医疗器械长度:12.5 cm剪切肌肉和棘突

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