小鼠模型中结肠镜引导下的钳取活检技术：一种用于观察和提取小鼠结肠组织样本的方法

摘要

来源：Montrose, D. C. 等人。在小鼠中进行结肠镜引导下的钳取活检并评估后续组织变化。J. Vis. Exp. (2021)

本视频演示了在小鼠中进行结肠镜引导下钳取活检的实验方案。该技术有助于直观分析结肠腔，并采集组织样本用于深入研究。

方案

所有涉及动物模型的操作均已经过当地机构动物护理委员会和 JoVE 兽医审查委员会审核。

1. 结肠镜检查与伤口诱导

1. 首先将1.9 mm刚性内窥镜插入鞘管中，完成内窥镜组件的预组装（图1A-B）。使用提供的管路将气泵（用于结肠充气）连接到鞘管左侧工作通道旁的气体阀门上（图1C）。
   注意： 尽管此处描述的镜头为0°，但也可使用30°镜头。
2. 确保工作通道处于打开状态，将3 Fr活检钳经工作通道插入，并向前推进至鞘管末端（注意确保其不伸出鞘管外）（图1C）。根据制造商说明，将组装好的内窥镜连接至光源和视频成像设备。
3. 在诱导室中使用含5%异氟烷的氧气对小鼠进行麻醉。随后将小鼠转移至带有加热系统（防止低体温）的内窥镜操作平台，腹侧朝下，并通过鼻罩以含2%异氟烷的氧气维持麻醉状态。在麻醉期间，向眼部涂抹兽用眼膏以防止角膜干燥。通过轻捏后肢足部检测反射，确认小鼠已完全麻醉。
   注意： 本技术适用于任何品系或性别的小鼠；但建议小鼠年龄至少为8周，以确保其体型足够大，便于操作。
   1. 在麻醉期间，向眼部涂抹兽用眼膏以防止角膜干燥。
   2. 通过轻捏后肢足部检测反射，确认小鼠已完全麻醉。
4. 用室温磷酸盐缓冲液（PBS）填充一支3 mL注射器，并连接大鼠灌胃针。将针头插入小鼠肛门约1 cm，缓慢注入PBS以清除粪便物质。注入的PBS应伴随数个粪便颗粒一同排出体外。
   注意： 注入过量PBS可能导致肠腔内泡沫形成，从而影响对肠腔的观察。
5. 将组装好的内窥镜插入小鼠肛门内0.5 cm。推进活检钳进入直肠腔，直至钳子的整个“钳口”部分（包括铰链）均超出鞘管末端（通过视频监视器观察确认）。将活检钳旋转90°，使钳口呈东西方向张开。
6. 进行活检时，张开钳口并向前推进约1 cm，然后闭合钳口，同时以一个流畅的动作迅速向后拉动活检钳，保持钳口闭合状态。
   1. 活检过程中应避免对结肠进行充分充气。因此，此步骤中应保持气体阀门右侧开放；但需注意，当钳口张开时，若结肠处于该状态，存在损伤黏膜的风险。

结果

图1： 进行活检所需的物品。（A）镜头（a）、外套管（b）和活检钳（c）的图像。（B）将镜头插入外套管中。（C）将活检钳经外套管的工作通道插入（实线箭头）。虚线箭头指示连接气泵的正确位置。

材料

本文使用的材料清单

姓名	公司	目录编号	评论
活检钳，3 Fr	Karl Storz	61071ZJ
Coloview 塔式系统	Karl Storz	contact company
检查鞘管，9 Fr，套装	Karl Storz	61029DK
Hopkins 望远镜，0'，1.9 mm × 10 cm	Karl Storz	64301AA
异氟烷	Covetrus	2905
Pawfly MA-60 水族泵	Amazon	N/A