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细菌性眼内炎小鼠模型:通过玻璃体内注射细菌悬液建立小鼠细菌性眼内炎的方法 关键词:细菌性眼内炎,小鼠模型,玻璃体内注射,细菌悬液,眼感染,实验性眼病

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2025年7月8日

本文内容

摘要

来源:Mursalin, M. H. 等,细菌性眼内炎小鼠模型中玻璃体内注射及感染参数的定量分析。J. Vis. Exp. (2021)。

本视频介绍了一种通过将细菌悬液注射到小鼠眼内玻璃体腔中,建立模拟细菌性眼内炎的小鼠模型的方法。细菌性眼内炎是一种由细菌侵入眼内玻璃体腔引起的内部感染。该小鼠模型有助于研究疾病的发病机制并评估潜在的治疗方法。

方案

所有涉及动物模型的实验程序均已通过当地机构动物护理委员会和 JoVE 兽医审查委员会的审核。

1. 无菌玻璃针

  1. 打开针式移液器拉制仪的电源。
  2. 调节加热器旋钮,直至显示屏显示数值为12.6。
  3. 打开门,手动将5 μL毛细管穿过上部夹具并穿过加热丝,使管子的一半长度延伸至加热丝下方(图1A)。
  4. 确认毛细管已置于上部夹具的“V”形槽内,然后拧紧上部夹具。
  5. 在下部夹具打开的状态下,手动向上调节垂直滑块,直至下部夹具达到其上限位置。确认毛细管位于下部夹具的“V”形槽内,然后拧紧下部夹具。
  6. 关闭门,确认“准备就绪”指示灯亮起。按下启动按钮,以启动加热和拉制程序(图1B)。
  7. 确保加热器在加热和重力作用将毛细管拉断后自动关闭(图1C),且滑块向下移动。
  8. 打开门,握住毛细管上端,松开上部夹具,取下上段毛细管并放置一旁。
  9. 握住底部滑块中的毛细管,松开下部夹具,取下下段毛细管并放置一旁。
  10. 使用配备0.05 μm氧化铝研磨板的微电极斜面研磨仪,对拉制后的毛细管进行斜面打磨,以制成注射针头。
  11. ....

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结果

显微注射装置、针头制备及测量过程,用于精确递送样品。
图1:制备斜面玻璃针。 玻璃针由一次性微毛细移液管通过拉针仪和微移液管斜面仪制成。(A) 将玻璃毛细管夹持在拉针仪中。(B,C) 使用设定电压拉制玻璃针。(D) 对玻璃微移液管进行斜面加工。(E,F) 斜面处理前后的玻璃微移液管。(E) 玻璃针的刻度:两个黑点之间的空间容纳 0.5 µL。

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材料

本文使用的材料清单
姓名公司目录编号评论
细胞显微注射仪 MicroData Instrument, Inc. PM2000 NA
5 微升微量毛细移液管 Kimble 71900-5 NA
微量移液管斜面研磨仪 Sutter Instrument Co. BV-10NA
OPMI Lumera 显微镜 Zeiss NA
反向操作镊子 Katena K5-8228NA

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