来源：Pacheco-Baltazar, A.，等，兔模型中的离体肺灌注系统。J. Vis. Exp. (2021)。
本视频展示了一种用于离体肺灌注的离体技术。该技术是肺部研究的工具，有助于研究肺移植过程中涉及的各种生理和病理机制。
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方法文章
离体肺灌注：一种用于兔模型肺部研究的技术
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2025年7月8日
本文内容
摘要
方案
所有涉及动物模型的实验程序均已通过当地机构动物护理委员会和 JoVE 兽医审查委员会的审核。
1. 插管：
- 将新鲜分离的兔肺连同心脏置于培养皿中的无菌纱布上。
- 为防止肺不张，采用正压通气方式对肺进行通气，呼气末正压（PEEP）设定为 2 cmH2O。
- 在房室沟水平处剪除心室，将其从心脏上移除。
- 打开两个心室后，将外径为 4.6 mm 带篮状结构的兔肺动脉插管经肺动脉插入，同时将外径为 5.9 mm 带篮状结构的兔左心房插管经二尖瓣插入左心房。
- 使用 4-0 丝线分别在肺动脉和左心房处固定插管。结扎时应包含肺动脉和左心房周围的组织，以避免这些结构扩张。
- 通过动脉插管注入 250 mL 生理盐水溶液，以冲洗血管床中残留的血液。
2. 灌注技术：
- 实验设置：
- 将分离的肺组织小心放入肺腔室中。
- 将气管连接至腔室盖上的换能器。
- 将插管的血管连接至灌注系统。
- 关闭腔室，并用旋转锁固定。
注意：循环灌注回路包括一个开放的静脉储液器、一个蠕动泵、一个热交换器和一个气泡捕获装置。 - 此时，安装腔室盖，....
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材料
| 姓名 | 公司 | 目录编号 | 评论 |
|---|---|---|---|
| 双止位Tygon E-Lab管，内径3.17 mm，每包12根，黑白双色 | Hugo Sachs Elektronik (HSE) | 73-1864 | |
| IPL-4正压通气适配器 | Hugo Sachs Elektronik (HSE) | 73-4312 | |
| IPL-4正压通气适配器 | Hugo Sachs Elektronik (HSE) | 73-4312 | |
| IPL-4负压通气期间向气管供应不同于室空气体混合物的替代无压供气装置 | Hugo Sachs Elektronik (HSE) | 73-4309 | |
| 兔至胎猪离体灌注肺基座单元 | Hugo Sachs Elektronik (HSE) | 73-4138 | |
| 牛血清A2:D41白蛋白冻干粉 | sigma | 3912 | 500 g |
| 氯化钙，CaCl2·2H2O | JT Baker | 10035-04-8 | |
| 冻存管 | Corning | 430659 | 2 mL |
| D-葡萄糖，C6H12O6 | sigma | G5767 | |
| 差分低压换能器DLP2.5，量程±2.5 cmH2O，HSE连接器 | Hugo Sachs Elektronik (HSE) | 73-3882 | |
| 差分压力换能器MPX，量程±100 cmH2O，HSE连接器 | Hugo Sachs Elektronik (HSE) | 73-0064 | |
| Eppendorf管 | |||
| 色谱纯无水乙醇 | Caledon | ||
| Falcon管 | 14 mL | ||
| 哈佛蠕动泵P-230（含控制箱和P-230电机驱动器） | Hugo Sachs Elektronik (HSE) | 70-7001 | |
| 加热式线性气流传感器，流量范围0至10 L/min | Hugo Sachs Elektronik (HSE) | 59-9349 | |
| 单气流传感器加热控制器，230 VAC，50 Hz | Hugo Sachs Elektronik (HSE) | 59-9703 | |
| 肝素 | PISA | 5000 UI | |
| 高效液相色谱柱（C18 100A 5U） | Alltech | 98121213 | 150 mm x 4.6 mm |
| 亲水性注射器滤器 | Millex | SLLGR04NL | 4 mm |
| IPL-4离体兔至胎猪肺核心系统，230 | Hugo Sachs Elektronik (HSE) | 73-4296 | |
| IPL-4离体兔至胎猪肺核心系统，230 V | Hugo Sachs Elektronik (HSE) | 73-4296 | |
| 带砂芯和管路的夹套玻璃缓冲液储液瓶，6.0 L | Hugo Sachs Elektronik (HSE) | 73-0322 | |
| 劳达恒温循环器，型号E-103，230 V/50 Hz，浴槽容积3 L，温度范围20至150°C | Hugo Sachs Elektronik (HSE) | 73-0125 | |
| 带篮式结构的兔左心房插管，外径5.9 mm | Hugo Sachs Elektronik (HSE) | 73-4162 | |
| PLUGSYS模块用低量程血压换能器P75 | Hugo Sachs Elektronik (HSE) | 73-0020 | |
| 七水合硫酸镁，MgSO4·7H2O | JT Baker | 10034-99-8 | |
| 微量离心管 | Corning | 430909 | |
| IPL-4负压通气控制选件，含压力调节器 | Hugo Sachs Elektronik (HSE) | 73-4298 | |
| 新西兰兔 | |||
| PISABENTAL（戊巴比妥钠） | PISA | Q-7833-215 | |
| PLUGSYS机箱，型号603*7 | Hugo Sachs Elektronik (HSE) | 73-0045 | |
| PLUGSYS TCM时间计数模块 | Hugo Sachs Elektronik (HSE) | 73-1750 | |
| PLUGSYS换能器放大模块（TAM-A） | Hugo Sachs Elektronik (HSE) | 73-0065 | |
| PLUGSYS换能器放大模块（TAM-D） | Hugo Sachs Elektronik (HSE) | 73-1793 | |
| PLUGSYS VCM-4R通气控制模块，含压力调节器 | Hugo Sachs Elektronik (HSE) | 73-1755 | |
| 氯化钾，KCl | JT Baker | 3040-01 | |
| 磷酸二氢钾，KH2PO4 | JT Baker | 7778-77-0 | |
| 带篮式结构的兔肺动脉插管，外径4.6 mm | Hugo Sachs Elektronik (HSE) | 73-4161 | |
| 灌注伺服控制器（SCP） | Hugo Sachs Elektronik (HSE) | 73-2806 | |
| 带卡扣盖的微量离心管 | Costar | 3620 | 1.7 mL |
| 碳酸氢钠，NaHCO3 | sigma | S6014 | |
| 氯化钠，NaCl | sigma | S9888 | |
| 7.5号外科手套 | |||
| 8号外科手套 | |||
| Taygon管 | Masterflex | ||
| 兔气管插管，外径5.0 mm | Hugo Sachs Elektronik (HSE) | 73-4163 |
