瞬膜切除术：一种从兔眼去除瞬膜的外科手术方法

摘要

来源：Honkanen, R. A.，等。利用兔完全泪腺切除术建立重度干眼模型。J. Vis. Exp. (2020)。

在本视频中，我们演示了一种从兔眼切除瞬膜的外科手术操作。

方案

所有涉及动物模型的实验程序均已通过当地机构动物护理委员会和 JoVE 兽医审查委员会的审核。

1. 瞬膜的切除

注意：为简便起见，下文仅描述右眼的操作技术。左眼应以完全相同的方式进行操作。在适应期（通常为第一周）内，双侧切除瞬膜。

1. 将兔子放入大小合适的固定袋中。
2. 使用1 cc注射器和26 G针头，在兔子肩部上方皮下注射乙酰丙嗪（1 mg/kg）以实现镇静。该轻度镇静的终点表现为动物头部保持放松位置，无正常的扫视运动，且耳朵不再完全竖立。
3. 使用移液器将25 µL无防腐剂的1%利多卡因滴入眼内。将金属眼睑撑开器插入眼睑之间。
4. 用0.3镊子（或同等工具）夹住瞬膜顶端，将其拉至角膜表面。使用26 G针头将含1:100,000肾上腺素的1%利多卡因注射至瞬膜的结膜下间隙。注射约0.3 mL，使瞬膜表面形成一个中等大小的水泡。注射量超过1 mL仍在兔子的安全剂量范围内（2−4 mg/kg）。
5. 取出金属眼睑撑开器。等待约5分钟，使利多卡因和肾上腺素发挥作用。在此期间，对对侧眼执行相同操作。
6. 重新插入金属眼睑撑开器。用0.3镊子夹住瞬膜并将其拉伸覆盖至角膜表面，使用斜视钩剪刀或同等器械在其基底部进行剪切。
   注意：出血通常较少，但应备好高温电池烧灼装置，必要时用于控制出血。若发生少量出血，也可通过对瞬膜切断基底部施加直接压力来止血。
7. 取出金属眼睑撑开器。在角膜表面涂抹局部抗生素眼膏（新霉素、多粘菌素、杆菌肽和氢化可的松）。
8. 根据实验方案要求，对对侧眼执行完全相同的手术操作。
9. 将动物放回各自的笼子中，至少恢复一周，或直至从临床角度确认结膜表面完全愈合后，再进行任何进一步的检测或干预措施。
   注意： 完全临床愈合的标志是结膜表面无任何肿胀、充血或分泌物。动物应能正常睁眼，无保护性上睑下垂现象。

材料

本文使用的材料清单

姓名	公司	目录编号	评论
乙酰丙嗪，Aceproinj	Henry Schein Animal Health, Dublin, OH	NDC11695-0079-8	以0.1ml/kg剂量皮下注射，用于兔镇静
动物固定袋	Henry Schein Animal Health, Dublin, OH	Jorvet J0170	使用合适尺寸的固定袋
高温电池供电电凝装置	Medline Industries Inc, Northfield, IL	REF ESCT001	备用以防出血，见方案2.7
镊子，0.3	Bausch and Lomb (Storz), Bridgewater, NJ	ET6319	用于瞬膜切除，见方案2.5
金属开睑器	Bausch and Lomb (Storz), Bridgewater, NJ	Barraquer SUH01	用于瞬膜切除，见方案2.4
含肾上腺素1:100,000的2%利多卡因；50:50混合液	Hospira Inc, Lake Forest IL	NDC 0409-3182-02	瞬膜切除前预处理用药，见方案2.4
不含防腐剂的利多卡因	Sigma-Aldrich, St. Louis, MO	L5647	以PBS配制成1%溶液作为麻醉剂用于眼部，见方案2.4
微量移液器	Eppendorf	Research Plus 100 uL	用于将不含防腐剂的利多卡因施用于眼部，见方案2.4
微量移液器吸头	World Wide Medical Products	41071052	用于将不含防腐剂的利多卡因施用于眼部，见方案2.4
26号针头	BD, Franklin Lakes, NJ	REF 305115	用于注射利多卡因/肾上腺素，见方案2.3 & 2.5
新西兰白兔	Charles River Labs, Waltham, MA (NZW)	2-3 kg	实验动物
Westcott肌腱剪	McKesson Medical-Surgical, San Francisco, CA	Miltex 18-1480	用于瞬膜切除，见方案2.7
1 cc注射器	BD, Franklin Lakes, NJ	ref 309659	用于注射利多卡因/肾上腺素，见方案2.3 & 2.5