从马供体关节中采集关节软骨：一种从马供体尸体关节中分离血管结缔组织的外科手术程序

摘要

来源：Benders, K. E. M. 等。脱细胞软骨来源基质支架的制备。J. Vis. Exp. (2019)

在本视频中，我们演示了从马的尸体关节中提取关节软骨的过程。分离得到的关节软骨可用于后续的下游分析。

所有涉及动物模型的操作均已通过当地机构动物护理委员会和 JoVE 兽医审查委员会的审核

1. 从供体（尸体）关节中获取关节软骨

在收获步骤之前，准备1 L软骨清洗液，其成分为无菌磷酸盐缓冲液（PBS），并添加100 U/mL青霉素、100 µg/mL链霉素和1%（v/v）两性霉素B。
在整个收获过程中需佩戴手套和实验服，因为供体可能携带病原体。
获取一个完整的（尸体来源的）关节用于软骨分离。
注意： 此时关节周围的皮肤仍保持完整。本方案使用从马匹获得的马膝关节软骨，但也可使用其他物种的其他关节。
使用手术刀和外科镊子去除目标关节区域周围的皮肤。如有必要，进一步清除多余的脂肪和肌肉组织，但不得损伤下方的关节。可选步骤：将处理好的尸体转移至生物安全柜中。
进行关节切开术，即分离关节，首先通过伸展和屈曲关节来确定关节的连接位置。
使用手术刀和外科镊子小心地去除更多层的脂肪、肌肉和肌腱，以暴露关节区域。
切开组织以进入关节腔。
注意： 关节腔内充满滑液，在正确切开时滑液可能从腔内滴出。
继续切断维持关节连接的肌腱，彻底打开关节。
检查软骨是否存在任何肉眼可见的损伤。
注意：

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解剖学解剖，绵羊脑显示半球，生物学教育研究。
图1： 去除全层厚度软骨后的马膝关节。 使用解剖刀从髁部去除软骨，直至达到无法用解剖刀切割的钙化软骨层。

化学提取过程：A-D 阶段，从沉淀到粉末形态，实验结果。
图 2： 制备脱细胞软骨来源基质颗粒的连续步骤。 （.......

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