生成兔颅骨缺损模型:在兔颅骨顶部创建圆形缺损以评估骨替代材料对骨再生能力的外科手术

摘要

来源:Marger， L. et al.， 兔骨增量模型，用于评估骨替代材料中的骨骼生长和新生血管形成。J. Vis. Exp. （2019 年）。

在本视频中，我们描述了生成兔颅骨模型的外科手术，以评估感兴趣的骨样本替代材料的骨再生能力。

方案

所有涉及动物模型的程序均已由当地机构动物护理委员会和 JoVE 兽医审查委员会审查。

1. 外科手术

1. 整地
   1. 将兔子放在手术台上用床垫垫（以避免烫伤）覆盖的加热垫 （39 °C） 上。剃掉头皮。
   2. 在眼睛上涂抹润滑凝胶，以避免刺激和干燥。用聚维酮碘 （10%） 擦洗皮肤对该部位进行消毒。然后用无菌手术布覆盖兔子，并为颅骨切出一个入口区域。
   3. 第二次用聚维酮碘 （10%） 对手术部位进行消毒。在眼睛上涂抹润滑凝胶，以避免刺激和干燥。
   4. 准备一张悬垂的桌子（无菌铺巾），在上面放置完整的手术托盘。
2. 手术部位开放
   1. 通过在颅骨上皮下 （SC） 注射 2% （1 mL） 利多卡因进行局部麻醉。
   2. 沿颅骨矢状线切开皮肤（用手术刀），从眼眶到枕外突（长度 ~4 cm）。确保骨膜被切开。
   3. 轻轻抬高切口两侧的骨膜（使用骨膜升降器）。用无菌盐水冲洗该部位。
3. 圆柱体放置
   1. 找到颅骨上的正中线和冠状缝线（图 2A、B）。请注意，这些解剖线形成一个十字。圆柱体将放置在由十字定义的每个象限中，确保圆柱体的边缘不在缝合线上（图 2C）。
   2. 将第一个圆柱体放在左上象限（左额骨）上，并尝试将装置平放。用手用力按压固定在位置，然后拧上微型螺钉，直到感觉到阻力。确保螺钉头与气缸片表面齐平。
   3. 在另一个选项卡上重复相同的步骤，将圆柱体紧紧地固定在头骨上。确保圆柱体密封固定在骨骼上。
   4. 在右上四分之一（右额骨）、左下四分之一（左顶骨）和右下四分之一（右顶骨）上重复该过程。
在
4. 圆柱体限定的区域内钻骨 5 个髓内孔（图 1）
   1. 在盐水冲洗下（直径 0.8 毫米，深 ~1 毫米）钻一个髓内孔，在圆柱体外的区域中心，在骨头上钻一个圆形毛刺。确保出现出血。
   2. 沿穿过两个凸片螺钉的轴线在圆柱体的内边缘再钻两个髓内孔。沿着垂直的斧头，在圆柱体的内边缘再钻两个髓内孔。确保出现出血。
   3. 在其他三个气缸中重复该作。
5. 用材料样品和封盖填充圆筒（图 3）
   1. 根据制造商的说明或材料规格准备所需的骨替代材料。
   2. 将材料样品填充到第一个圆筒的边缘，然后装上盖子关闭圆筒。在其他 3 个气缸中重复该过程。
6. 手术部位闭合
   1. 用间歇性不可吸收缝合线闭合圆柱体上方的皮肤。
   2. 在伤口上涂抹可喷涂敷料。

2. 术后治疗

1. 停止镇痛和麻醉（异丙酚和芬太尼灌注停止）供应，并检查自主呼吸的恢复情况。
2. 一旦动物恢复自主呼吸，就停止通气。在完全唤醒之前，将动物保持在纯氧下。
3. 注射盐酸丁丙诺啡 SC （0.02 mg/kg、0.03 mg/mL、0.67 mL/kg）并每 6 小时重复注射 3 天作为术后镇痛。
4. 将动物转移到它通常的笼子里，加水并完全喂食。

结果

图 1:PEEK 气瓶的规格。在横向稳定片上钻了两个孔（直径 0.8 毫米）用于拧紧。在圆柱体划定的区域内，要在颅骨上钻的 5 个髓内孔（直径 0.8 毫米）的位置用红色圆圈标记。

图 2:兔子头骨的代表性图像和圆柱体的位置。 图片显示兔子头骨上的正中和冠状缝合线勾勒出左右顶骨和额骨 （A，B）。将圆柱体放置在缝合线的两侧 （C）。比例尺 = 5 毫米。

材料