基于重组腺相关病毒的基因递送：一种用于转基因递送及在啮齿类动物模型中实现心脏特异性表达的技术

摘要

来源：Ding, J. 等. 在小鼠心脏中过表达或敲低基因的rAAV9制备方法. J. Vis. Exp. (2016)

在本视频中，我们展示了基于重组腺相关病毒的基因递送技术在小鼠幼崽中的应用。该方法有助于研究靶向细胞中的基因表达。

方案

1. 在出生后0.5至2.5天通过皮下注射对新生小鼠进行rAAV9处理。

1. 用重组腺相关病毒9型（rAAV9）溶液预填充一支29G1/2、0.33 × 12.7 mm的胰岛素注射器。注意去除气泡。
2. 用一只手的拇指和食指固定冷冻麻醉后的小鼠幼崽。 注射前，用浸有70%异丙醇的棉签擦拭幼鼠背部皮肤，以维持无菌条件。将注射器针头以5°至10°的角度插入动物的前背侧皮下组织，使用胰岛素注射器注射50–70 µl的rAAV9溶液。    
   注意：rAAV9也可通过腹腔内或静脉注射方式递送至小鼠体内，可在心脏中实现递送基因的高效表达。然而，腹腔注射有时可能导致肝脏出现渗漏性表达。注射后，每天监测幼鼠的健康状况。

材料

本文使用的材料清单

姓名	公司	目录编号	评论
rAAV9 载体	宾夕法尼亚大学载体中心	P1967