巴氏染色：一种用于观察输卵管细胞细胞学特征的技术

摘要

来源：Chen, H. 等. 输卵管细胞学作为卵巢癌早期检测的有前景工具。J. Vis. Exp. (2017)。

在本视频中，我们展示了一种改良的巴氏染色方案，用于研究输卵管细胞学。该技术可用于观察良性和恶性输卵管上皮细胞的细胞学特征。

方案

1. 改良巴氏染色法实验步骤

1. 按照 表1所示的自动化非妇科染色程序对组织涂片进行染色。
   注意：该染色方法是对我们常规用于非妇科标本的巴氏染色技术的一种改良。本研究中我们使用自动组织处理仪对部分玻片进行染色。本研究选择非妇科染色程序而非妇科染色程序。所用的伊红为EA-65，而非用于妇科标本（巴氏涂片标本）的EA-50。此外，由于本研究中预期不会观察到鳞状细胞，因此未包含妇科染色程序中的OG-6（主要用于鳞状细胞染色）。EA65（伊红-天青）是一种由三种染料组成的复染液：伊红Y、亮绿FCF和俾斯麦棕Y。该程序如 表1所示。
2. 按以下步骤进行手工快速巴氏染色：
   1. 将组织涂片浸入95%乙醇中10次，每次约1秒。
   2. 将玻片浸入H₂O中10次，每次约1秒。
   3. 将玻片浸入苏木精中10–60秒。
   4. 将玻片浸入H₂O中10次，每次约1秒。
   5. 将玻片浸入95%乙醇中10次，每次约1秒。
   6. 将玻片浸入EA65中1–3分钟。
   7. 将玻片浸入H₂O中10次，每次约1秒。
   8. 将玻片浸入95%乙醇中10次，每次约1秒。
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材料

本文使用的材料清单

姓名	公司	目录编号	评论
巴氏染色液，EA 65	sigma aldrich	HT40432
95% 乙醇	sigma aldrich	652261
100% 乙醇	sigma aldrich	493538
二甲苯	sigma aldrich	214736
苏木精	sigma aldrich	H9627