来源:Pei, J. 等,一种用于准确测定线粒体毒剂细胞毒性的自动化差异核染色检测方法。J. Vis. Exp. (2020)
本视频展示了一种核染色方法,用于检测线粒体靶向抗癌剂(mitocan)对药物敏感型癌细胞及健康细胞变体的细胞毒性作用。利用碘化丙啶和Hoechst染料等DNA结合染料进行双重染色,可清晰区分死细胞与活细胞,从而有助于评估药物的细胞毒性。
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2025年7月8日
来源:Pei, J. 等,一种用于准确测定线粒体毒剂细胞毒性的自动化差异核染色检测方法。J. Vis. Exp. (2020)
本视频展示了一种核染色方法,用于检测线粒体靶向抗癌剂(mitocan)对药物敏感型癌细胞及健康细胞变体的细胞毒性作用。利用碘化丙啶和Hoechst染料等DNA结合染料进行双重染色,可清晰区分死细胞与活细胞,从而有助于评估药物的细胞毒性。
1. 细胞毒性检测:实验设置
2. 细胞毒性检测:Hoechst 33342 与碘化丙啶染色
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| 姓名 | 公司 | 目录编号 | 评论 |
|---|---|---|---|
| 2-脱氧-D-葡萄糖/2-DG | Chem-Impex | 50-519-067 | |
| 3-溴丙酮酸 | Alfa Aesar | 1113-59-3 | |
| 96孔板 | Greiner Bio-One | 655090 | 黑色或透明平底96孔板 |
| Countess II 自动细胞计数仪 | Thermo Fisher | ||
| Cytation 5 细胞成像多功能微孔板检测仪 | BioTek | ||
| Hoechst 33342 | Thermo Fisher | 62249 | 20 mM 溶液;终浓度 1:1,000 |
| HyClone 胎牛血清 | GE Healthcare | #25-514 | |
| m-氯苯腙/CCCP | Sigma Aldrich | C2759 | |
| PBS 片剂 | Thermo Fisher | BP2944100 | 1 片 + 200 mL 无菌水 = 1× PBS 溶液 |
| 青霉素-链霉素-谷氨酰胺(100×) | Gibco | 10378016 | |
| 碘化丙啶 | Thermo Fisher | 50-596-072 | 干粉;储存液 1 mg/mL(溶于 PBS);终浓度 5 µg/mL(白血病细胞),1 µg/mL(正常外周血单个核细胞) |
| 鱼藤酮 | Ark Pharm | AK115691 | |
| RPMI-1640 培养基(含 L-谷氨酰胺和碳酸氢钠,液体,无菌过滤,适用于细胞培养) | Sigma Aldrich | R8758-500ML | |
| 台盼蓝染液(0.4%) | Gibco | 15250-061 | |
| 细胞系 | |||
| K562 | ATCC | CCL-243 | 慢性髓系白血病细胞系 |
| MOLM-13 | ATCC | 急性髓系白血病细胞系 | |
| MOLT-4 | ATCC | CRL-1582 | 急性淋巴细胞白血病细胞系 |
| OCI-AML2 | ATCC | 急性髓系白血病细胞系 |