植物组织中非结构性碳水化合物的比色定量测定

摘要

来源：Deans, C. A. 等. 以玉米（Zea mays）为例定量测定植物可溶性蛋白质和可消化碳水化合物含量. J. Vis. Exp. (2018)。

本视频介绍了定量测定植物组织中可消化碳水化合物的方法。该方法有助于从多种植物组织中收集数据，以研究营养生态学、植物与草食动物的相互作用以及食物网动态。

方案

1. 植物采集与处理

1. 采集植物样品后，使用镊子将植物材料浸入液氮中进行速冻，并在 -80 °C 下保存。如果采集的植物样品过大而无法进行速冻，应使用干冰快速冷却，并尽快转移至 -80 °C 冰箱中。植物组织从植株分离后，其大量营养元素含量可能发生改变，因此在采集后应尽快冷冻样品。
   注意：液氮接触皮肤可导致严重冻伤。请确保使用经批准的容器运输液氮，并在操作时穿戴适当的个人防护装备（PPE），包括低温手套、护目镜、面罩、围裙和实验服。
2. 使用冷冻干燥机对植物材料进行冻干，以确保在去除水分的过程中组织处于代谢失活状态。持续干燥直至样品质量稳定，以确保所有水分已被完全去除。
3. 样品干燥后，使用研磨机或研磨仪将其研磨成细粉。将样品存放在干燥柜中，直至进行分析。

2. 可消化碳水化合物检测

1. 样品制备
   1. 将每种组织样品分别称取约 20 mg 的重复样品，放入带有橡胶衬里螺旋盖的 15 mL 玻璃试管中（长度 100 mm）。这些样品后续将被称为未知样品。使用防水记号笔或在管盖上贴标签胶带进行标记，并记录每个样品的精确质量，因为该信息将用于计算每个未知样品中的碳水化合物百分比。
2. 从每个未知样品中提取可消化碳水化合物。
   1. 向每个试管中加入 1 mL 的 0.1....

材料

本文使用的材料清单

姓名	公司	目录编号	评论
酶标仪（分光光度计）	Bio-Rad 型号	680 XR