从小鼠模型中采集腹股沟引流淋巴结

摘要

来源：Rezende, R. M. 等，利用离体共聚焦显微镜观察淋巴结结构及细胞定位。J. Vis. Exp. (2019)

本视频展示了从小鼠模型中手术分离引流腹股沟淋巴结的操作过程。通过切开腹部区域，可暴露腹股沟淋巴结，并将其手术摘取。所获得的透明腹股沟淋巴结可用于免疫学研究。

方案

所有涉及动物模型的操作均已被当地机构动物护理委员会和 JoVE 兽医审查委员会审核。

1. 实验所用小鼠

1. 使用8周龄的雄性和雌性B6背景小鼠。

2. 切除腹股沟引流淋巴结的手术操作

1. 使用 CO₂ 窒息法处死小鼠，随后进行颈椎脱位。
2. 用胶带将小鼠固定在丙烯酸板上，并用棉签在腹部皮肤涂抹矿物油，以防止切口周围残留毛发（图 1B）。无需去除毛发。
3. 使用显微外科弯剪（11.5 cm）和显微外科弯镊（12.5 cm），从耻骨至剑突沿腹部中线做切口（图 1C）。
4. 将腹部肌肉组织与皮肤分离（图 1D）。
5. 在垂直切口线的顶端和底端做水平皮肤切口，以在目标侧（根据抗体混合物注射侧）形成皮瓣，并翻开皮肤以暴露淋巴结（图 1E）。
6. 用胶带将皮瓣固定在丙烯酸板上（图 1F）。
7. 使用显微外科弯镊摘除腹股沟引流淋巴结（图 1F）。淋巴结在皮下呈半透明、通常为双叶状的球形结构。

结果

图1：腹股沟淋巴结制备
(A向大腿内侧皮下注射FACS抗体混合液。B注射后3小时处死小鼠，用胶带将小鼠固定在丙烯酸板上，并在腹部皮肤涂抹矿物油，以防止切口周围残留毛发。C从耻骨至剑突沿中线作腹部切口。D将腹部肌肉组织与皮肤分离，并制作皮瓣。E...

材料

本文使用的材料清单

姓名	公司	目录编号	评论
显微外科弯头镊子	WEP Surgical Instruments	Custom-made	12.5 cm
显微外科弯头剪刀	WEP Surgical Instruments	Custom-made	11.5 cm