一种诱导佐剂性关节炎小鼠模型的技术

摘要

来源：Lu, Q. 等。检测小鼠中性粒细胞的迁移与浸润。J. Vis. Exp. (2020)。

本视频展示了一种在小鼠模型中诱导佐剂性关节炎的方法。将完全弗氏佐剂（CFA）注射至小鼠踝关节及关节周围区域。CFA可激活免疫系统，导致中性粒细胞浸润和炎症反应加剧。

方案

所有涉及动物模型的操作均已被当地机构动物护理委员会和 JoVE 兽医审查委员会审核。

1. 佐剂诱导性关节炎（AA）小鼠模型的建立

1. 通过涡旋振荡至少5秒使完全弗氏佐剂（CFA）悬浮均匀，然后用胰岛素注射器吸取100 µL悬浮液。
   注意：建议在实验中使用全新的CFA，以确保无菌。
2. 按照前述方法对小鼠进行麻醉。
3. 标记选定的足爪，并向踝关节腔内注射20 µL CFA。在选定足爪的四个关节周围部位各注射20 µL悬浮液（共80 µL）。
4. 将小鼠从呼吸麻醉装置中取出，并将处理后的小鼠放入新的饲养盒中。监测小鼠呼吸情况，直至其恢复自主活动能力。
5. 每3天使用便携式厚度测量仪测量踝关节直径，以评估关节肿胀程度（图1A）。
6. 每3天根据关节炎评分标准评估关节炎严重程度（图1C）：0分，正常，无关节发红或肿胀；1分，最轻度关节炎，仅跗骨或踝关节出现轻微发红和肿胀；2分，中度关节炎，发红和轻度肿胀从踝关节延伸至跗骨；3分，重度关节炎，发红和中度肿胀从踝关节延伸至跖骨关节；4分，最严重关节炎，发红和严重肿胀累及踝关节、足部及脚趾，或出现肢体强直。

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结果

图 1：佐剂诱导性关节炎（AA）小鼠模型的代表性结果。 （A）使用便携式测厚仪测量踝关节直径。（B）根据踝关节直径评估关节肿胀程度（n = 7）。（C）各关节炎评分对应的图片。（D）关节炎严重程度按 0−4 分进行评分（n = 7）。数据以均值 ± 标准差表示。

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材料

本文使用的材料清单

姓名	公司	目录编号	评论
15 mL 圆锥形聚丙烯离心管	Falcon	14-959-53A
23 G × 1 1/4" 针头	BD	305120
26 G × 3/8" 针头	BD	305110
30 G × 1/2" 针头	BD	305106
完全弗氏佐剂，10 mg/mL	sigma	1002036152
Eppendorf 微量管，1.5 mL	Sigma	Z606340
表盘式厚度规	Mitutoyo	7301
Shu Rui U40 一次性无菌胰岛素注射针头，1 mL	BD	328421