建立雌性小鼠尿路感染模型

摘要

来源：Zychlinsky Scharff, A. 等，小型动物模型中的尿路感染：雄性和雌性小鼠的经尿道插管。 J. Vis. Exp. (2017)

本视频展示了通过经尿道导管灌注在雌性小鼠膀胱中建立尿路致病性Escherichia coli感染的方法。注入的细菌可在膀胱内成功建立尿路感染，为研究与尿路相关的医疗相关疾病提供了有价值的实验平台。

方案

所有涉及动物模型的实验程序均已通过当地机构动物护理委员会和 JoVE 兽医审查委员会的审核。

1. 导管的制备

1. 为每组待感染的小鼠准备一个儿科静脉穿刺导管。按照制造商说明，利用内置弹簧装置将每个导管的针头卸下。丢弃针头，仅保留塑料静脉导管部分。
2. 在超净工作台中对导管进行紫外线（U.V.）照射消毒一个周期，通常为 25 - 30 分钟。
   注意：导管可多次用于同一只小鼠，但在不同实验组、不同性别或不同细菌菌株之间应使用新的导管。

2. 感染用尿路致病性 Escherichia coli 的制备

1. 感染前至少两天，使用无菌接种环将尿路致病性 Escherichia coli（UPEC）从冷冻菌种中划线接种至含抗生素（如适用）的Luria肉汤（LB）琼脂平板上，37 °C过夜培养。平板可在4 °C保存最多一周。
2. 在100 ml无菌锥形瓶中，加入10 ml含抗生素（如适用）的LB液体培养基，接种LB平板上的单个菌落，37 °C静置培养过夜（约16–18小时）。
   注意：静置培养有利于表达I型菌毛....

材料

本文使用的材料清单

姓名	公司	目录编号	评论
BD Insyte Autoguard 防护型静脉导管 24G，外径 0.7 mm，长 14 mM	BD Medical	381811 或 381411*	* 目录编号因国家而异
接种环	Greiner Bio-One	731171
LB Miller 肉汤	Difco	244620
LB Miller 琼脂	Difco	244520
比色皿	Bio-rad	223-9955
注射器	B Braun	9166017V
胰岛素注射器	Terumo	BS05M2913