通过创伤接种真菌建立水稻植株叶片感染

摘要

来源：Zhang, M. 等，植物感染试验：喷雾与伤口介导的植物病原菌 Magnaporthe grisea接种方法 J. Vis. Exp. (2018)

本视频展示了通过伤口接种Magnaporthe grisea菌丝体建立水稻植株叶片感染的方法。真菌孢子萌发形成的芽管穿透表皮层，导致叶片组织感染并形成病斑。该方法有助于致病型筛选，并加深对植物抗性机制的理解，从而促进分子育种研究。

方案

1. 真菌培养用于 M. grisea

1. 制备真菌菌株用的燕麦番茄琼脂（OTA）培养基。
2. 称取30–50 g燕麦片，加入800 mL蒸馏水/去离子水（ddH₂O），在电热锅中煮沸混合物30分钟。
3. 通过纱布将煮沸的燕麦汁过滤至烧杯中。
4. 向烧杯中的滤液中加入150 mL番茄汁和20 g琼脂，并加入ddH₂O₂O 至 1,000 mL。

2. 实验材料的准备

1. 将约50粒水稻种子浸泡Oryza sativa品种丽江新团黑谷（LTH）在ddH₂O中₂O 处理 3 天或浸泡约 50 粒大麦种子（大麦 cv Golden Promise）在 ddH₂O 中₂约1天。
2. 将水稻或大麦种子用湿润纱布包裹，置于约30个直径为10 cm × 10 cm的培养皿中的湿润滤纸上，在28 °C条件下萌发。水稻种子萌发时间约为2–3 d，大麦种子萌发时间约为2 d。温室相对湿度约为70%。
3. 将水稻或大麦幼苗种植于花盆中，使用经高压灭菌的盆栽土并浇水，然后覆盖一层蛭石。
4. 将植物置于适宜的玻璃温室或人工气候箱....

材料

本文使用的材料清单

姓名	公司	目录编号	评论
琼脂	AOBOX Biotechnology (中国)	01-023
滤纸	GE Healthcare 品牌 (瑞典)	10311387
Tween-20	Coolaber (中国)	CT11551-100ml
培养皿	Thermofisher (美国)	150326
真空泵	Leybold	D25B
解剖针	FST	26000-35
培养箱	MEMMERT	PYX313