小鼠模型中实验性自身免疫性脑脊髓炎的诱导

Abstract

来源:Barthelmes， J. et al.， 小鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎的诱导和免疫细胞在各种组织中疾病依赖性分布的评估。J. Vis. Exp.（2016 年）

该视频演示了通过注射髓鞘少突胶质细胞糖蛋白和灭活结核分枝杆菌的组合，在小鼠模型中诱导实验性自身免疫性脑脊髓炎。该模型使研究人员能够研究疾病机制和测试治疗干预措施。

Protocol

所有涉及动物模型的程序均已由当地机构动物护理委员会和 JoVE 兽医审查委员会审查。

1. 实验性自身免疫性脑脊髓炎或 EAE 模型

1. EAE 模型的归纳
   1. 使用 10 至 13 周龄雌性 129S4/SvJae×C57BL/6 小鼠诱导 EAE。
   2. 将产脑性 MOG_{35 - 55}（髓鞘少突胶质细胞糖蛋白）肽 （200 μg） 皮下注射到小鼠的上背部和下背部，乳化在 200 μl 含有 400 μg 结核分枝杆菌的完全弗氏佐剂 （CFA） 中><。 注意:作为阴性、非疾病诱导的假对照，可以使用含有结核分枝杆菌的不完全弗氏佐剂，体积相同，途径相同。
   3. 此后，24 小时后，给小鼠腹膜内注射百日咳毒素（总共 0.2 μg，用 200 μl 磷酸盐缓冲盐水，PBS 稀释）。使用未经治疗的小鼠作为对照组，以便能够将患病动物与健康动物进行比较。
      注意:也可以用 200 - 300 μg MOG_{35 - 55} 肽、300 - 500 μg CFA 结核分枝杆菌和 0.2 - 0.3 μg 百日咳毒素诱导 EAE，每次注射体积为 0.1 - 0.2 ml。
   4. 注射后一周开始，每天检查小鼠的临床症状（参见步骤 1.2.1）
      注意:发病的日期在不同的实验中有所不同，但在我们实验室的条件下，大约是第 11 天，因此，这里的第 14 天定义为发病后 3 天。本研究中的所有小鼠均出现临床症状。

2. 小鼠评分

1. 按临床评分对临床症状进行分类如下:0） 无体征，0.5） 尾巴远端麻痹，1） 尾巴完全麻痹，1.5） 尾巴跛行和后腿轻度无力，2） 尾巴跛行和后腿严重无力，2.5） 尾巴跛行和一条后腿瘫痪，3） 尾巴跛行和双后腿瘫痪， 3.5） 双侧后肢瘫痪和一侧前肢无力（达到此评分的小鼠被安乐死，以符合当地伦理准则）。

Materials