一种基于分子的流感病毒A型和B型定量检测方法

摘要

来源：Otto, C. C. 等，流感病毒A和B的快速分子检测与区分。J. Vis. Exp. (2017)

该视频展示了一种用于定量甲型和乙型流感病毒的检测方法。该方法采用切口内切酶扩增技术，结合流感病毒特异性引物，并利用分子信标探针进行靶标检测。

方案

所有涉及样本采集的操作均按照本机构的IRB指南进行。

1. 实验开始前

注意：甲型和乙型流感检测适用于鼻咽拭子样本以及保存在病毒运送培养基中的鼻咽拭子。试剂盒中包含拭子，应使用这些拭子以获得最佳性能。然而，也可使用棉、泡沫、植绒或聚酯鼻拭子采集鼻拭子样本。

1. 采集鼻拭子样本时，将拭子插入分泌物最明显或最堵塞的鼻孔。轻轻旋转拭子并推进至遇到阻力为止，然后在鼻腔壁上反复旋转数次，再缓慢从鼻孔中取出。将拭子采集后立即放入含有 3 ml 病毒运输液（VTM）的试管中储存并运送。
   注意：必须谨慎规范地进行样本采集，因为采集不当可能导致错误结果。
   注意：拭子样本应在采集后尽快进行检测。若无法立即检测，可于室温下保存最多 2 小时，或在 2–8 °C 冷藏最多 24 小时。新鲜采集的样本最有利于实现最佳检测性能。样本处理、储存和/或运输不当可能导致错误结果。
   注意：作为预防措施，操作本检测的人员在处理样本时应遵循普遍性防护原则，将所有样本视为潜在传染性物质对待。
2. 检测前将所有样本恢复至室温。
   注意：所有检测试剂组件仅限一次性使用，不得用于....

材料

本文使用的材料清单

姓名	公司	目录编号	评论
Alere i 仪器	Alere	NAT-000（全球），NAT-024（美国）
Alere i 流感A & B 24 测试试剂盒	Alere	425-000（全球），425-024（美国）
Alere i 条形码扫描仪	Alere	EQ001001
Alere Universal Printer	Alere	55115（全球），alereiprinter（美国）
200 µL 微量移液器
200 µL 一次性移液器吸头
病毒运输培养基	Remel	M4-RT