使用磁荧光纳米传感器检测细菌污染

摘要

来源:Shelby， T.， Sulthana， S.， McAfee， J.， Banerjee， T.， Santra， S. 使用磁荧光纳米传感器进行食源性病原体筛查:大肠杆菌 O157:H7 的快速检测。J. Vis. Exp. （2017 年）。

该视频演示了一种使用纳米传感器检测食品和水样品中细菌污染物的技术。通过磁弛豫和荧光发射模式的组合来检测目标病原菌。

方案

1. 使用 MFnS 快速检测 O157:H7 型大肠

杆菌

在
1. 增加 ^10-6 细菌原液的量中加入各种 PBS 溶液（1X，pH 7.4,300 μL），得到 CFU 范围为 1-100。向这些溶液中加入一定量的 MFnS （100 μL）。
2. 创建一个仅包含 PBS（1X，pH 7.4,300 μL）和 MFnS （100 μL） 的基线溶液。
3. 将溶液在 37 °C 下孵育 30 分钟，然后让它们冷却至室温。
4. 将单个溶液转移到磁性松弛计 （0.47 Tesla） 中，并记录相对于每个溶液中 CFU 的弛豫时间 （T2） 的变化。
   1. 要记录 T2 值的变化，首先测量仅包含 PBS 和 MFnS 的基线溶液的 T2 值。
      1. 将溶液放入磁性松弛计中。打开相应的软件，选择 "T2 relaxation" 设置，然后按 "measure"。
      2. 收集基线 T2 后，测量加标不同浓度细菌的其他溶液的 T2 值。
         注意:T2 的变化相当于从加标 T2 中减去基线 T2。
5. 从磁性松弛计中取出样品，并以 2880 x g 离心管 10 分钟。
6. 倒出上清液，并将细菌沉淀重悬于 100 μL PBS（1X，pH 7.4）中。
7. 向 96 孔板中加入 80 μL 每种重悬液，并在 595 nm 处记录荧光强度><。 注意:可以使用不同的溶剂（包括湖水、牛奶和其他溶剂）重复测试，如结果部分所述。

材料