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方法文章

大鼠离断跟腱内注射富含血小板血浆

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2025年7月8日

本文内容

摘要

来源:Greimers, L.,同种异体富血小板血浆(PRP)对大鼠离断跟腱愈合过程的影响:方法学描述J. Vis. Exp. (2018)。

本视频演示了一种将富血小板血浆(PRP)注射到大鼠离断的跟腱部位的技术。首先从受体大鼠的跟腱上切除一小段组织,对切口部位进行缝合,并让大鼠恢复。与此同时,从供体大鼠采集全血,经离心获得富血小板血浆(PRP),随后将其激活并注射至受体大鼠的缝合部位,以诱导跟腱修复。

方案

所有涉及动物模型的操作均已通过当地机构动物护理委员会和 JoVE 兽医审查委员会的审核。

1. 动物准备

  1. 使用132只体重为320–450 g的2月龄雄性Sprague-Dawley大鼠(其中120只用于实验,12只用于采血,图1)。每组15只大鼠即可达到0.8的检验效能(若存在指定效应,有80%的概率发现统计学显著性)。
  2. 将所有大鼠饲养于传统笼具中,在配备更衣站的普通设施内实施隔离饲养。在独立通风笼具(IVC)架中进行繁殖,特定无病原体(SPF)级大鼠需专门采购。
  3. 采用以下饲养条件:温度范围19–24 °C;相对湿度:40–60%;通风:换气频率每小时10–15次;光照/黑暗周期:12小时光照–12小时黑暗。
  4. 对所有笼具设备进行灭菌,并使用辐照垫料。通过在笼内放置无菌纸板托盘和毛巾,系统性实施笼内环境丰富化措施。
  5. 限制人员进入该区域,进入时须穿戴新的实验服、口罩、手套、鞋套和头帽。
  6. 根据Felasa对普通设施的建议,每年对饲养在污染垫料上的哨兵动物进行群体健康监测。每笼饲养4至5只动物,提供适当的辐照饲料,并自由饮用酸化水ad libitum。每日进行监测。
  7. 在手术前2小时,将选定接受手术干预的大鼠转移至过滤顶笼,并送入手术室。

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结果

大鼠实验流程图;PRP注射、生物力学测试、组织学、肌腱研究、30天。
图1:研究的实验设计。

手术步骤、肌腱解剖和测量在四幅系列图像中展示。
图2:手术过程。

(a)去除周围筋膜后的肌腱复合体。

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材料

本文使用的材料清单
姓名公司目录编号评论
赛拉嗪(Xyl-M)VMD麻醉剂
氯胺酮(Jétamine 1000 CEVA)CEVA Santé Animale麻醉剂
布托啡诺(Vetergésic Multidosis)ALSTOE镇痛药
碘伏(iso-Betadine)MEDA-Pharma消毒剂
可吸收缝线Vicryl 6/0Johnson & Johnson
戊巴比妥钠(Nembutal)CEVA Santé Animale麻醉剂
多聚甲醛Sigma-AldrichP6148保存组织结构
异丙醇 100%VWR2,09,22,364
乙醇 95%VWR2,08,23,362
二甲苯VWR28973.363
石蜡VWRLEIC3950.1006
苏木精Millipore1.15938.0025染色剂
伊红Millipore1.15935.0100染色剂
EukittSigma-Aldrich3989封片介质
CaCl2

标签

PRP