在活体小鼠前肢肌肉中测量复合肌肉动作电位

摘要

来源：Pollari, E. 等人， 体内 小鼠运动神经元变性模型中前肢复合肌肉动作电位的电生理测量 视频实验杂志 (2018).

本视频演示了一种在小鼠体内测量复合肌肉动作电位（CMAP）的技术。该技术概述了电极设置、刺激支配肌纤维的前肢神经元以及记录肌肉反应的步骤。该方法可用于评估神经元脱髓鞘及功能性神经元的丢失。

方案

所有涉及动物模型的操作均已通过当地机构动物护理委员会和 JoVE 兽医审查委员会的审核。

1. 动物准备与麻醉

1. 使用异氟烷/氧气吸入法对小鼠进行麻醉诱导。麻醉诱导时使用4%异氟烷，维持时使用2-3%异氟烷，氧气流速为2.5 L/min。根据小鼠的状况调整麻醉维持期间的异氟烷浓度。 即，体型较小且虚弱的小鼠所需的麻醉剂剂量较低。确认麻醉充分 例如通过轻压后肢行走垫以确认无疼痛退缩反射。
2. 使用37 °C恒温加热板控制小鼠体温，以防止麻醉期间体温下降。
3. 将小鼠戴上鼻罩以维持麻醉状态。通过检查鼻罩是否阻塞气道以及小鼠是否呼吸平稳，确保动物获得充足的氧气供应。
4. 记录过程中，通过观察小鼠的呼吸频率（麻醉状态下约为1 Hz）以及轻压时是否缺乏缩足反射，来监测其麻醉深度。若麻醉深度不足，需手动提高异氟烷浓度。
5. 测量结束后，将小鼠置于加热板上或红外灯的温暖环境中恢复，直至其意识恢复到能够维持胸卧位，大约需要2-5分钟。在小鼠完全从麻醉状态恢复之前，不得将其单独留下或与其他小鼠放在一起。

前肢复合肌肉动作电位的测量

1. 使用27 G针状电极进行前肢复合肌肉动作电位（CMAP）测量。电极放置位置参见

结果

图1. CMAP测量中电极的放置位置。 图中展示了后肢（A）和前肢（B）的电极位置。电极编号如下：1：阳极刺激电极，2：阴极刺激电极，3：记录电极，4：参考电极，以及5：接地电极。

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材料

本文使用的材料清单

姓名	公司	目录编号	评论
可重复使用的皮下针电极，铂/铱合金	Technomed	TE/S61-434	针长13 mm (0.51")，直径0.4 mm (27G)
Natus神经电生理诊断系统	Natus Neurology	UltraPro S100	肌电图设备
Synergy	Natus Neurology	版本 20.1.0.100	UltraPro S100配套的肌电图软件
Physitem Controller	Rothacher-Medical GmbH	TCAT-2LV	加热垫
combi-vet 基础麻醉系统 数字流量计 配备TEC 3蒸发器	Rothacher & Partner	CV 30-301-D	异氟烷蒸发器及流量计
Iso-Vet 1000 mg/g	Piramal Healthcare UK Limited	AP/DRUGS/220/96	异氟烷
SOD1-G93A 小鼠	The Jackson Laboratory	#002726	肌萎缩侧索硬化症转基因小鼠及非转基因对照同窝仔鼠，仅雌性
PrP-hFUS-WT3 小鼠	The Jackson Laboratory	#017916	肌萎缩侧索硬化症转基因小鼠及非转基因对照同窝仔鼠，各组雄性和雌性数量均衡
C57BL/6Jax 小鼠	The Jackson Laboratory	#000664	用于轴突切断实验的非转基因小鼠，包含雄性和雌性
C61-PMP22 小鼠	该小鼠品系由德国哥廷根马克斯·普朗克实验医学研究所M. Sereda教授慷慨赠送。		腓骨肌萎缩症转基因小鼠及非转基因对照同窝仔鼠，各组雄性和雌性数量均衡