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方法文章

记录大鼠动脉压力变化引起的肾交感神经活动反应

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2025年7月8日

本文内容

摘要

来源:Fink, A. M.,在麻醉大鼠中量化中枢神经系统干预引起的肾交感神经活动的急性变化J. Vis. Exp. (2018)。

本视频演示了一种研究大鼠动脉压力变化时肾交感神经(RSNs)活动的技术。首先将压力感应导管连接至股动脉,暴露肾交感神经。随后将神经提起并置于记录电极上,记录其电活动。接着注射血管收缩药物以升高血压,并监测肾交感神经活动的相应变化。

方案

所有涉及动物模型的操作均已通过当地机构动物护理委员会和 JoVE 兽医审查委员会的审核。

1. 制备双极RSNA电极

  1. 制备电极时,剪取两段长约18 mm的不锈钢丝。另剪取一段长约15 mm的聚乙烯(PE-50)管。将两根金属丝穿入管中,使金属丝两端均露出管外。
  2. 剥离金属丝末端的绝缘层,修剪后保留2–3 mm的裸露金属丝。在一端,将公针压接在裸露的金属丝上。将针脚牢固地焊接到金属丝上,将针脚固定在连接器条内,并用环氧树脂覆盖连接处。
    注意:一种无需焊接的替代方法是使用快速连接/拆卸的鳄鱼夹。
  3. 在电极的另一端,剥离金属丝末端的绝缘层,保留2–3 mm的裸露金属丝。将该部分金属丝弯折,形成小“V”形钩状结构。
    注意:此部分电极将与肾交感神经接触。必须对这一端进行密封,以防止液体进入管内。可有效使用硅胶或环氧树脂进行密封。

2. 给予麻醉并准备手术区域

  1. 对一只雄性Sprague Dawley大鼠(年龄9-11周,体重150-400 g)实施麻醉。通过腹腔(IP)注射给予戊巴比妥钠50 mg/kg。为评估手术期间稳定的麻醉深度,每15分钟检查一次足趾夹捏反射,并根据需要....

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结果

肾交感神经活动图;显示原始、整流后的RSNA、噪声、血压随时间变化。
图1:静脉注射去氧肾上腺素后肾交感神经活动(RSNA)和血压(BP)的变化。 原始RSNA(A)经全波整流处理(B);插图C显示整流后压碎的“零”RSNA。计算了非重叠的10秒平均值(减去噪声)(D)。为诱发压力感受性反射,于箭头处静脉注射0.1 mL去氧肾上腺素(1 µg/mL)。推注给药引起血压急剧升高,并短暂抑制RSNA。脚桥被盖核调控戊巴比妥麻醉大鼠的肾交感神经活动及心呼吸活动

....

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材料

本文使用的材料清单
姓名公司目录编号评论
不锈钢丝A-M Systems; Sequim, WA791000RSNA电极
聚乙烯(PE-50)导管VWR; Radnor, PA63019-048RSNA电极;血管插管
微型针式连接器A-M Systems; Sequim, WA520200RSNA电极
压接工具Daniels Manufacturing Corp.; Orlando, FLM22520RSNA电极
连接器条带Amphenol; Clinton Township, MI221-2653RSNA电极
J-B Kwik 环氧树脂胶J-B Weld, Sulphur Springs, TX8270RSNA电极
硅胶Permatex; Hartford, CT2222RSNA电极
肝素钠注射液(10 mL 小瓶,1000 U/mL)KV Veterinary Supply; David City, NEP03466静脉通路通畅性维持
盐酸去氧肾上腺素注射液(1 mL 小瓶,10 mg/mL)ACE Surgical Supply; Brockton, MA950-6312检测肾交感神经抑制
单钩弹性外科固定夹Harvard Apparatus; Holliston, MA72-2595切口
丝质外科胶带3M, Minneapolis, MN1538-0固定外科固定夹
20 G 针头Sigma-Aldrich; St. Louis, MOZ192554-100EA血管插管
Dumont #7 弯头镊Fine Science Tools; Foster City, CA11274-20血管插管
5-0 丝线结扎线Braintree Scientific; Braintree, MASUT-S 106血管插管
精细止血钳Roboz Surgical Instrument Co.; Gaithersburg, MDRS-7117血管插管和RSNA手术
Crile 止血钳Fine Science Tools; Foster City, CA13004-14针头弯曲
遥测发射器Data Sciences International; Minneapolis, MNPA-10平均动脉压监测(遥测)
Re-gel 注射器Data Sciences International; Minneapolis, MN276-0038-001遥测发射器重复使用(遥测)
一次性压力换能器Transpac; San Clemente, CAMI-1224平均动脉压监测
Clear-Cuff 压力输注器MILA International Inc.; Florence, KY2281339平均动脉压监测
血管插管镊Fine Science Tools; Foster City, CA00574-11导管插入
黑色单丝尼龙4-0缝线,带反向切割针McKesson Medical-Surgical; San Francisco, CAS661GX固定遥测发射器
遥测接收器Data Sciences International; Minneapolis, MNRPC-1平均动脉压监测(遥测)
LabChart Pro(软件),PowerLab(数据采集硬件)AD Instruments; Colorado Springs, COML846, MX2 matrix 2.0(兼容Data Science International遥测系统)软件/数据采集硬件的3种选择
SciWorks(软件),DataWave(数据采集硬件)DataWave Technologies, Loveland, CON/A
Spike 2(软件),Micro1401-3Cambridge Electronic Design Ltd., London UK1401-3
微型钻Roboz Surgical Instrument Co.; Gaithersburg, MDRS-6300中枢神经系统手术
立体定位手术架Stoelting; Wood Dale, IL51600中枢神经系统手术
带10X前置放大器的微电极放大器A-M Systems; Sequim, WA1800-2RSNA记录
牵开器Fine Science Tools; Foster City, CA17009-07RSNA记录
显微解剖镊Fine Science Tools; Foster City, CA11251-10RSNA记录
微型钩Fine Science Tools; Foster City, CA10064-14RSNA记录
矿物油Fisher Scientific; Waltham, MA8042-47-5RSNA记录
音频监测器A-M Systems; Sequim, WA3300RSNA记录
硅胶Wacker, Munchen; GermanyRT601A-BRSNA记录
电夹Tyco Electronics; Schaffhausen, SwitzerlandEB0283-000接地或固定灌注针
Bonn 剪刀,直头/锐头Roboz Surgical Instrument Co; Gaithersburg, MDRS-5840灌注
灌胃针Harvard Apparatus; Holliston, MA75-0286灌注
Masterflex 灌注泵Cole-Parmer; Vernon Hills, IL7524-10灌注
Masterflex 铂金固化硅胶管Cole-Parmer; Vernon Hills, IL96410-15灌注
甲醛(10% 缓冲溶液,4 L)Sigma-Aldrich; St. Louis, MOHT501128灌注
蔗糖Sigma-Aldrich; St. Louis, MOS0389抗冻保护

标签

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