来源：Zhang, X. 等，利用河豚毒素抗性钠通道检测果蝇中的单突触连接。视觉化实验杂志 (2018)
本视频演示了利用转基因果蝇测试单突触连接的方法。该果蝇的突触前神经元表达对河豚毒素不敏感的钠通道以及对红光敏感的通道蛋白，通过光遗传学手段激活这些通道，使突触前神经元兴奋并传递信号至突触后神经元。
方法文章
2025年7月8日
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| 姓名 | 公司 | 目录编号 | 评论 |
|---|---|---|---|
| UAS-csChrimson | Bloomington 果蝇品系中心 | 55135 | 用作神经元激活工具 |
| UAS-NaChBac | Bloomington 果蝇品系中心 | 9466 | 在河豚毒素（TTX）存在下恢复细胞兴奋性 |
| 河豚毒素（Tetrodotoxin） | Tochris | 1078 | 购买河豚毒素可能需要特殊许可，因其属于管制物质 |
| 全反式视黄醛（all trans-Retinal） | Sigma-Aldrich | R2500 | 视蛋白通道的必需辅因子 |
| 可焊接 321 不锈钢 薄板， 厚度 0.002 英寸， 宽度 10 英寸 | McMaster Carr | 3254K7 | 用于制作定制果蝇固定装置。定制箔片可使用提供的 PDF 文件在 pololu.com 进行激光切割 |
| 解剖显微镜 | 蔡司（Zeiss） | Stemi 2000-C | 用于制备样品的解剖操作 |
| 电热蜡笔（Waxer） | Almore | Eectra Waxer 66000 | 解剖过程中用于将果蝇固定在箔片上 |
| 石蜡（Paraffin Wax） | Joann | 4917217 | 与电热蜡笔配合使用 |
| 5 号镊子（Number 5 forceps） | 精细科学工具公司（Fine Science Tools） | #5CO | 用于解剖和去鞘操作 |
| 解剖剪刀（Dissection Scissors） | 精细科学工具公司（Fine Science Tools） | 15001-08 | 用于解剖过程中去除部分体壁组织 |
| 钨丝（Tungsten wire） | A-M Systems | 797500 | 通过电解处理制备锋利的解剖针具 |
| 循环式蠕动泵（Recirculating Peristaltic Pump） | Simply Pumps（Amazon） | PM200S | 用于循环河豚毒素（TTX）溶液 |
| 蠕动泵调速控制器（Speed Controller for peristaltic pump） | Zitrades（Amazon） | N/A | PWM 调光控制器，适用于 LED 灯或灯带，12 伏特 8 安培，可调亮度开关调光器，DC12V 8A 96W，适用于 LED 灯条 |
| Versa-Mount 精密压缩空气调节器 | McMaster Carr | 1804T1 | 用于封接过程中施加正压 |
| 玻璃毛细管（Glass capillaries） | 世界精密仪器公司（World Precision Instruments） | TW150F-3 | 用于制作记录电极 |
| 多功能压力表（Multipurpose Gauge） | McMaster Carr | 3846K431 | 用于压力调节器的压力监测 |
| 电生理摄像系统（Electrophysiology Camera） | Dage MTI | IR-1000 | 任何可在红外范围（850 nm）工作的摄像机均可使用。应避免使用红光照明，以免激活 csChrimson |
| 红外 LED（IR LED） | Thorlabs | M850F2 | 用于斜向照明 |
| 红外 LED 光纤（Fiber optic for IR LED） | Thorlabs | M89L01 | 与红外 LED 耦合 |
| 物镜 | 奥林巴斯 40X | LUMPlanFLN | 该物镜适用于大多数显微镜系统，对果蝇神经元的可视化效果良好 |
| 琥珀色 LED（Amber LED） | Thorlabs | M590L3d | 用于观察 RFP 和 mCherry 荧光信号 |
| 蓝色 LED（Blue LED） | Thorlabs | M470L3d | 用于观察 GFP 荧光信号 |
| GFP 滤光片组（GFP filter set） | Chroma | 49011 | 用于观察 GFP 荧光或激活 ChR2 视蛋白 |
| 定制 mCherry 滤光片组（Custom mCherry Filter Set） | Chroma | et580/25x 和 t600lpxr（来自 49306 滤光片组），但使用 et610lp 作为阻挡/发射光滤光片 | 仅在需要对表达 ChR2 视蛋白的特定神经元进行封接记录时使用 |
| 用于合并琥珀色与蓝色 LED 的二向色镜（Dichroic to combine Amber and blue LED） | Thorlabs | DMLP550R | 仅在 mCherry 标记下进行封接，同时使用蓝光激活 ChR2 视蛋白 |
| 红色 LED（Red LED） | LEDSupply | Cree XPE 620 - 630 nm | 用于激活 csChrimson |
| LED 驱动器（LED Driver） | LEDSupply | 3021-D-E-1000 | 用于驱动光遗传学刺激所需的 LED |
| 微操纵器（Manipulator） | Sutter Instruments | MP-225 | 用于记录过程中精确定位电极 |
| 膜片钳放大器（Patchclamp Amplifier） | A-M Systems | Model 2400 | 使用功能相当的放大器亦可 |
| 贝塞尔滤波器（Bessel Filter） | Warner Instruments | LPF 202A | 辅助滤波器，用于在封接过程中对电流信号进行滤波后送至示波器 |
| 数据采集系统 | 国家仪器公司（National Instruments） | NI PCIe-6321 781044-01 | 用于将放大器信号记录至计算机 |
| BNC 接线端子模块 - BNC-2090A | 国家仪器公司（National Instruments） | 779556-01 | 用于连接放大器与数据采集卡 |
| 钢箔 | McMaster Carr | 3254K7 | 用于制作定制记录室的钢箔材料 |
| 磁铁 | K&J Magnetics | D42 | 用于将记录室固定在铁架台上 |
| 1/16" 透明浇铸丙烯酸板 | Pololu | 用于制作定制记录室。丙烯酸板可使用提供的 PDF 文件在 pololu.com 进行激光切割 |
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