记录幼年大鼠的听觉脑干诱发电位

摘要

来源：Chang, A. 等，新生大鼠听觉脑干反应及外毛细胞全细胞膜片钳记录。J. Vis. Exp. (2018)。

本视频演示了一种记录幼鼠听觉脑干反应（ABRs）的方法。该方法概述了电极放置、声音刺激施加以及脑干信号处理分析的步骤，以评估神经反应。

方案

所有涉及动物模型的操作均已经过当地机构动物护理委员会和 JoVE 兽医审查委员会的审核。

1. 听觉脑干反应（ABR）记录

1. 通过单次腹腔注射1.5%戊巴比妥钠（幼鼠22 mg/kg，成年鼠30 mg/kg，两性均适用，1-14日龄幼鼠及2月龄成年Sprague Dawley (SD)大鼠）进行麻醉。
2. 将麻醉后的动物置于聚乙烯泡沫模具中以固定其身体，并放置于隔声室内的防震台上。使用加热垫维持动物体温在37.5 °C。
3. 用70%（体积/体积）乙醇擦拭头部区域。使用精细剪刀在外耳廓腹外侧做1-2 mm切口，用于放置参考电极或接地电极。记录电极（皮下针电极）置于颅骨顶点处（图1A）。
4. 使用函数发生器产生经过校准的不同频率（2、4、8、16、24和32 kHz）和强度（从85 dB SPL以5 dB步长递减至10 dB SPL）的声脉冲刺激（上升/下降时间1 ms，平台期3 ms）。通过计算机或手动调节频率和振幅。声刺激由位于动物头部前方10 cm处的静电扬声器传递。
5. 使用多功能处理器对诱发的电位信号进行滤波（100-1,000 Hz）、放大并平均叠加256次，以获取听觉脑干反应（ABR）。ABR波形实时监测并储存，供后续离线分析。完成一只动物的ABR记录约需40分钟。
   注意：通常可识别出3至7个潜伏期小于15 ms的波峰（I波至VII波）（图1B）。ABR阈值定义为能够检测到I波和II波的最低声强水平。
6. 在动物苏醒前实施安乐死（腹腔注射0.3 mL 1.5%戊巴比妥钠）。

结果

图1. 听觉脑干反应记录。 (A) 记录电极插入两耳之间的头皮，接地电极和参考电极分别置于左耳和右耳耳廓下方。一个开放式场扬声器放置在大鼠鼻尖前方10 cm处。(B) 对16 kHz、80 dB SPL短声刺激产生的两个典型ABR波形。上方波形记录自P8幼鼠，下方波形记录自成年大鼠。数字表示波形的不同波峰。

材料

本文使用的材料清单

姓名	公司	目录编号	评论
戊巴比妥钠	Sigma	P3761	1.5% 水溶液
SD 大鼠	南方医科大学实验动物中心
ES1 扬声器	Tucker-Davis Technologies
TDT system 3	Tucker-Davis Technologies
SigGenRP 软件	Tucker-Davis Technologies
BioSigRP 软件	Tucker-Davis Technologies
jClamp	Scientific Solutions
低噪声数据采集系统	Axon	1440A