麻醉大鼠同时进行脑电图和局部场电位记录

摘要

来源:Kang， S. 等人 啮齿动物共定位脑电图和局部场电位的并发记录。J. Vis. Exp. （2017 年）。

该视频演示了在麻醉大鼠中同时记录共定位脑电图 （EEG） 和局部场电位 （LFP） 的程序。该过程包括准备大鼠并将刺激电极连接到其胡须垫上。将 EEG 蜘蛛电极放置在大鼠的头骨上，用于表面 EEG 测量。同时，通过颅骨上的钻孔将多通道微电极插入特定的大脑区域，以记录来自局部大脑区域的神经活动。

方案

所有涉及动物模型的程序均已由当地机构动物护理委员会和 JoVE 兽医审查委员会审查。

1. 共定位 EEG/LFP 设置

1. 使用棉签清洁并擦干毛刺孔周围的颅骨。
2. 小心地将导电 EEG 糊剂放在 EEG 蜘蛛电极的一侧。在蜘蛛电极上留下一个小孔，让多层微电极穿过孔，而不接触糊状物和蜘蛛电极。这可以防止 EEG 电极和微电极之间的电接触。
3. 将蜘蛛电极对准颅骨上的钻孔，使 EEG 糊状物面向颅骨。
4. 小心地将蜘蛛电极压在颅骨上，通过 EEG 糊剂与颅骨牢固接触。使用注射器上的针头去除任何遮盖毛刺孔的糊状物。
5. 去除蜘蛛电极外围以外的过多脑电图糊，以便蜘蛛电极和颅骨之间的接触在空间上受到电极尺寸的限制（图 1B）。
将
6. EEG 糊涂在 EEG 的参考电极上，并将其牢固地放在大鼠脖子后部的切口内。
7. 通过无源信号分配器将 EEG 电极连接到前置放大器，以获得低阻抗信号（图 2）。确保蜘蛛电极的阻抗低于 5 kΩ。如果不是，请检查 EEG 糊是否与颅骨接触良好，并且电极牢固地压在 EEG 糊上。如有必要，添加更多 EEG 粘贴。
8. 将显微作器臂安装在立体定位框架上。将线性 16 通道微电极（间距 100 μm，每个部位的面积 177 μm²）连接到牢固地夹在显微作器臂上的 16 通道急性头台。
将
9. EEG 粘贴物涂抹在 EEG 和微电极的参考电极上，然后将它们牢固地放置在切口内（图 1A）。
10. 调整显微作器臂的角度，使微电极垂直于皮质表面。这个角度通常在 25-35° 之间。
11. 在显微镜下转动显微纵器旋钮，使微电极的尖端对准毛刺孔底部的小开口，直到最上面的电极刚好穿透皮质表面。必须注意避免将微电极强行压到硬脑膜表面，因为这会破坏电极。
12. 将 16 通道微电极耦合到通过光纤电缆连接到数据采集单元的前置放大器（图 2）。
13. 打开前置放大器、数据采集单元和连接到该单元的计算机。打开刺激器盒。
14. 通过缓慢转动显微作器的 z 轴旋钮至 1,500 μm 的深度，将微电极正常插入皮质表面。
15. 通过对晶须垫施加一系列刺激并使用安装在 PC 上的数据采集单元的软件在 PC 监视器上观察 16 通道诱发的 LFP 来微调深度。小心地转动显微作器上的 z 轴旋钮，直到诱发的 LFP 的最高振幅出现在通道 7 附近（因为这与皮层的第 IV 层重合><）。 注意:同侧脑电图电极设置:对于某些实验，第二个蜘蛛电极放置在桶状皮层上方完整颅骨的同侧。这种设置允许在静息状态下进行双侧脑电图记录，以研究毛刺孔对脑电图信号的影响。
    注意:设置 EEG 电极的外科手术与上述相同，只是头部两侧的颞肌与颅骨小心地分离，缝合背部并牢固地系在立体定位框架的相应一侧><。 注意: 并发 EEG/LFP 设置也与上述设置相同，还有一个额外的步骤，即第二个蜘蛛电极加载 EEG 糊状物，然后牢牢地压在 ipsi 外侧桶皮层上方的颅骨上。

结果

图 1:并发 EEG/LFP 记录的一般设置。（A） 该设置包括一个改进的鼻锥，以便在异氟烷麻醉下进行胡须垫刺激，两个插入胡须垫的刺激电极，一个位于桶形皮层上方颅骨上的蜘蛛电极，与刺激电极相对，一个通过蜘蛛电极插入桶形皮层的多通道微电极，以及放置在大鼠颈部后部切口内的参比电极。（B） 通过显微镜看到的蜘蛛电极被 EEG 糊剂牢固地放置在颅骨上。将微电极插入蜘蛛电极下方的颅骨中钻出的毛孔中。头皮由绑在立体定位框架上的手术线（缝合线）固定。

图 2.信号流图。

材料