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Drosophila 暴露于长时间光照后的突触调节

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2025年7月8日

本文内容

摘要

来源:Sugie, A., 等. 分析Drosophila melanogaster感光细胞在长时间光照暴露后的突触调节。 J. Vis. Exp. (120)

本视频展示了在特定光照条件下培育黑腹果蝇(Drosophila melanogaster),以研究Bruchpilot蛋白在神经递质释放中的作用及其对突触活动的调节效应。

方案

1. 光照条件

  1. 从幼虫阶段到羽化期间,将果蝇置于25 °C的12小时光照/12小时黑暗循环(LD)环境中饲养(图1A)。
  2. 在羽化后0 - 6小时内收集果蝇,并将其放入含有果蝇饲料的新试管中。
  3. 将试管置于一个透明的丙烯酸树脂架上,该架具有三级台阶(总高度41 cm,底座21 cm,厚度4 cm,每级台阶高度13 cm)(图1B)。
  4. 调节该支架与LED面板之间的距离,使用数字照度计测量,使光照强度平均保持在1,000勒克斯(lux)(图1C)。
  5. 将果蝇在25 °C的小型培养箱中饲养1 - 3天,培养条件可选择以下之一:持续黑暗(DD)、12小时光照/12小时黑暗循环(LD)或持续光照(LL)(图1A图1C)。

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结果

昼夜节律实验装置:光周期示意图、试管存放、光照/果蝇培养室。
图1:特定光照强度暴露条件的准备。(A)羽化后光照暴露方案。DD,持续黑暗;LD,12小时光照/12小时黑暗;LL,持续光照。在括号所示时间点解剖果蝇大脑(改编自先前发表的研究9)。(B)试管置于定制的丙烯酸透明支架中并排列整齐。(C)将丙烯酸支架与两块LED面板一同放入小型培养箱中,并调节至使果蝇暴露于1,000 lux光照强度的条件。

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材料

本文使用的材料清单
姓名公司目录编号评论
小瓶Hightech, 日本MKC-20
塞子Thermo Fisher Scientific, 美国AS-275
定制透明丙烯酸树脂支架Shin-Shin Corporation, 日本高度为 41 cm,底座为 21 cm,厚度为 4 cm,每级台阶高度为 13 cm
冷却培养箱MITSUBISHI ELECTRIC, 日本CN-40A
LED 面板MISUMI, 日本LEDXC170-W
数字照度计CEMDT-1301
果蝇操作垫Tokken, 日本TK-HA03-S

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标签

Bruchpilot LED

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