记录耳聋小鼠的电诱发听觉脑干反应

摘要

来源:Navntoft， C. A.， et al.C57BL/6 小鼠的人工耳蜗手术和电诱发听觉脑干反应记录。J. Vis. Exp.（2019 年）

该视频演示了在耳聋的小鼠中植入人工耳蜗并施加电刺激以记录听觉脑干反应的过程。该程序能够理解电听觉的基本机制，并有助于人工耳蜗技术和听觉神经科学的进步。

方案

所有涉及动物模型的程序均已由当地机构动物护理委员会和 JoVE 兽医审查委员会审查。

1. 插入人工耳蜗 （CI） 电极阵列

注意:耳蜗内电极阵列由四个铂带 （Ø0.2 mm） 和铂/铱聚对二甲苯绝缘线屏蔽在硅胶管中（图 1）组成。

1. 将牵开器工具放入切口中以重新进入大疱。
2. 将电极阵列插入圆窗 （scala tympani） 中，第 4 个铂环位于圆窗内。这给出了 ~2 mm 的插入深度，对应于 ~30 kHz 的耳蜗内位置。
3. 将导联线缠绕在大疱内，并将导联线粘在大疱上方的组织中。盘绕导线有助于在整个实验过程中将阵列保持在原位。
4. 小心地取出牵开器并用纸巾胶闭合插入物。
5. 使用组织剪刀在颈部垂直于主动和参考听觉脑干反应 （ABR） 电极之间的线，在颈部做一个小切口 （0.5 mm）。将铂研磨球放入皮下袋中，并用组织胶闭合小切口（图 2）。
6. 将电极阵列板连接到动物刺激器平台 （ASP）。

2. 电听觉脑干反应 （eABR）

注意:动物刺激器平台用于电刺激电极阵列。可以使用其他电流源和软件系统。

1. 用 70% 乙醇溶液清洁 ABR 电极。将电极放在皮肤下:活性 （Ch1） 在顶点上，参考 （-） 位于同侧耳廓下方，并在后腿中接地（图 2）。
2. 打开 ASP 软件并定义电脉冲刺激范例。我们使用电荷平衡双相脉冲，相位为 50 μs，相位间隙为 10 μs，每秒脉冲数为 23.3 （pps）。电刺激以单极电极配置提供，电流水平增加。每个当前级别总共平均 400 个响应。
3. 通过 Tucker Davis Technologies （TDT） 头级、前置放大器和听觉处理器连续呈现电脉冲序列并记录诱发的 eABR 响应。
4. 通过定制的 Matlab 脚本绘制和分析 eABR 数据（图 3）。剧本和录音示例在补充文件中提供。

结果

图 1:小鼠人工耳蜗。（A） 耳蜗内电极阵列由四个铂带组成，间隔为 0.4 mm，直径为 d:0 [尖端] （d=0.21）、1 （d=0.23）、2 （d=0.25）、3 （d=0.27）。每个电极的宽度为 0.2 mm。四根铂/铱 （90/10） 聚对二甲苯绝缘线屏蔽在硅胶管中。（B） 电极阵列尖端的放大倍率（红色虚线方块）。电极阵列和铂参考球连接到印刷板。比例尺 = 1 毫米。

图 2:电诱发 ABR （eABR） 设置。CI ...

材料