利用脂多糖在大鼠模型中诱导脑微出血

摘要

来源：Li, D.，等。脂多糖注射诱导大鼠亚急性脑微出血。J. Vis. Exp. (2018)。

本视频展示了在大鼠模型中使用脂多糖（LPS）诱导血脑屏障（BBB）破坏及脑微出血的过程。重点阐述了导致血脑屏障通透性增加及继发性脑组织损伤的免疫反应序列。

方案

所有涉及动物模型的实验程序均已通过当地机构动物护理委员会和 JoVE 兽医审查委员会的审核。

1. 材料

1. 制备LPS注射液​
   1. 将25 mg来源于Salmonella typhimurium的LPS粉末溶于25 mL蒸馏水中，配制成终浓度为1 mg/mL的溶液。将该注射液储存于4 °C的无菌试管中。
      注意：LPS具有毒性。

2. 动物

1. 通过腹腔注射方式，向10周龄（平均体重：280 ± 20 g）的雄性Sprague-Dawley（SD）大鼠注射LPS。
   注意：若大鼠从其他机构购买，则适应期不应少于7天。

3. LPS 注射

1. 以每公斤体重1 mg的剂量向每只大鼠腹腔注射LPS，并将大鼠放回其原饲养笼中。
   注意：无需麻醉。
2. 6小时后，向大鼠再次注射相同剂量的LPS。
3. 16小时后，向大鼠再次注射相同剂量的LPS。
   注意：以每公斤体重1 mg的剂量向SD大鼠注射LPS可能导致5%的死亡率。在幼龄、老龄或妊娠雌性大鼠中，死亡率可能进一步升高。
4. LPS注射后将大鼠放回笼中，并自由提供食物和饮水。
   注意：大鼠将表现出明显的全身性炎症反应，因此实验期间必须保持笼具清洁。首次LPS注射后，应频繁（每日2次）监测大鼠的体重、整体外观和精神状态。若大鼠出现弓背姿势、不愿活动、显著体重减轻（>20%）或眼鼻分泌物染色（porphyrin staining），应在7天实验终点前实施人道安乐死。

材料

本文使用的材料清单

姓名	公司	目录编号	评论
LPS	Sigma-Aldrich	L-2630	用于诱导炎症
磷酸盐缓冲液 (PBS)	Solarbio	P1022	实验中常用的缓冲溶液