在大鼠模型中检测脑微出血

摘要

来源：Li, D., Zhào, H., 等. 脂多糖注射诱导大鼠亚急性脑微出血。J. Vis. Exp. (2018)。

本视频展示了一种在大鼠模型中检测脑微出血（CMHs）的实验方法。CMHs 是由于血脑屏障破坏导致的脑内出血，通过外渗的红细胞（RBCs）进行识别。在大鼠模型中，固定后的脑组织经冷冻保护、切片，并用苏木精-伊红染色以标记红细胞，从而可在显微镜下观察 CMHs。外渗的红细胞在显微镜下呈红橙色。

方案

所有涉及动物样本的操作均已经过适当的动物伦理审查委员会审核并批准。

1. 材料

1. 脂多糖（LPS）注射液的制备
   1. 将25 mg来源于Salmonella typhimurium的LPS粉末溶于25 mL蒸馏水中，配制成终浓度为1 mg/mL的溶液。将注射液置于无菌管中，4 °C保存。
      注意：LPS具有毒性。
   2. 用正常的0.9%生理盐水配制2%伊文思蓝（EB）溶液，使EB注射液保持工作浓度。

2. 动物

通过腹腔注射的方式，向10周龄的雄性Sprague-Dawley（SD）大鼠（平均体重：280 ± 20 g）给予LPS。
注意：若大鼠从其他机构购买，则适应期不应少于7天。

3. LPS 注射

1. 向每只大鼠腹腔注射1 mg/kg的LPS，然后将大鼠放回原笼具中。
   注意： 无需麻醉。
2. 6 小时后，向大鼠注射相同剂....

材料

本文使用的材料清单

姓名	公司	目录编号	评论
LPS	Sigma-Aldrich	L-2630	用于诱导炎症
EB	Sigma-Aldrich	E2129	用于EB渗漏检测
HE染色	Solarbio	G1120	HE染色试剂盒
水合氯醛	Sigma-Aldrich	47335U	用于麻醉
磷酸盐缓冲液（PBS）	Solarbio	P1022	实验中常用的缓冲溶液
0.9%生理盐水溶液	海南东联长富药业有限公司，中国		用于灌注的溶液
多聚甲醛	Sigma-Aldrich	158127	常用于固定的溶液
20%蔗糖溶液	Solarbio	G2461	常用于固定的溶液
30%蔗糖溶液	Solarbio	G2460	常用于固定的溶液
兽用软膏	Solcoseryl眼用凝胶，Bacel，瑞士		用于大鼠眼部保护