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方法文章

建立自体血注射诱导的蛛网膜下腔出血大鼠模型

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2025年7月8日

本文内容

摘要

来源:Bömers, J. 等. 大鼠模型中通过视交叉前单次注射自体血诱导实验性蛛网膜下腔出血. J. Vis. Exp. (2021)

本视频演示了建立蛛网膜下腔出血大鼠模型的操作步骤。对麻醉后的大鼠植入探针,用于测量颅内压和脑血流量。确定目标位置后,将针头插入视交叉前位置。随后将自体血注入蛛网膜下腔,导致颅内压升高、脑血流量下降,从而成功建立模型。

方案

所有涉及动物模型的操作均已通过当地机构动物护理委员会和 JoVE 兽医审查委员会的审核。

1. 准备工作

  1. 改造16 G外周静脉导管用于插管。改造方法:将针头缩短1 cm,并将剩余远端1 cm部分向注射阀方向弯曲30°。拆除导管翼(可重复使用)。
  2. 制作颅内压(ICP)探头时,取一段20 mm长的聚乙烯管(内径(ID):0.58 mm,外径(OD):0.96 mm),烧灼一端形成圆形板状结构,同时保持管腔开放。在聚乙烯管周围包裹1 mm长的硅胶管(内径(ID):1.0 mm,外径(OD):3.0 mm),然后将一段10 mm长的硅胶管(内径(ID):0.76 mm,外径(OD):2.4 mm)连接至聚乙烯管的末端。
  3. 打开笔记本电脑并启动数据采集软件。根据制造商的说明对血压(BP)和颅内压(ICP)换能器以及激光多普勒进行校准。
  4. 准备血气分析仪设备。
    注意: 确保异氟烷挥发罐中有足够的异氟烷。
  5. 打开 O2 和大气气流。设置O的流量2 30% 氧气和70% 大气空气
  6. 将加热垫放置到位,并将温度设置为 37 °C。

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结果

手术操作,啮齿类动物模型中标注的解剖结构,血管研究的实验装置。
图1:诱导蛛网膜下腔出血(SAH)前实验装置的概览。 从图的上方可见,1)注射针、2)激光多普勒探头和3)颅内压(ICP)探头均已就位。

血压、颅内压、脑血流量时间序列图;心血管和脑血流动力学分析。
图 2:鞘内注射后的示例曲线。 红色曲线表示以 mmHg 为单位的.......

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材料

本文使用的材料清单
姓名公司目录编号评论
16 G 外周静脉导管BD Venflon393229针头缩短,远端 1 cm 弯曲,翼片已移除
麻醉罩/麻醉室未知
血气分析仪RadiometerABL80
血压(BP)监测仪AdinstrumentsML117连接至 Powerlab
弯头镊,12 cm × 3F.S.T11001-12用于麻醉
圆柱形枕头,28 cm × 4 cm自制由手术毛巾制成
数据采集硬件AdinstrumentsML870 Powerlab
数据采集软件AdinstrumentsLabChart 6.0
钻机KMD1189
钻机控制器Silfradent300 IN
柔性光源SchottKL200
加热垫Minco1135
皮下注射针头,20 GKD Medical301300连接至立体定位仪
颅内压(ICP)监测仪AdinstrumentsML117连接至 Powerlab
异氟烷蒸发器OhmedaTEC3
笔记本电脑LenovoT410
激光多普勒监测仪AdinstrumentsML191
激光多普勒探头Oxford OptronicsMSF100XP连接至激光多普勒监测仪
持针器,13 cmF.S.T12001-13用于麻醉
精密注射器,0.025 mLHamilton547407
立体定位仪Kopf InstrumentsM900
手术显微镜Carl ZeissF170
缝合针Allgaier1245用于麻醉
温度控制器CWE,INC.TC-1000
换能器 × 2AdinstrumentsMLT0699连接至血压和颅内压监测仪
呼吸机Ugo Basile7025
兽用剪毛器AesculapGT421
三齿 Blair 拉钩,13.5 cmAgnthos17022--13
钝头 Alm 拉钩F.S.T17008-07
弯头镊,12 cm × 2F.S.T11001-12
持针器,13 cmF.S.T12001-13
直头 Dumont 镊,11 cmF.S.T11252-00
直头 Halsted-Mosquito 止血钳 × 2F.S.T13008-12
直头 Iris 剪,9 cmF.S.T14090-09
直头 Vannas 剪,10.5 cmF.S.T15018-10
可吸收棉片Kettenbach31603
黑色丝线,4-0,5 × 15 cmVömel14757
骨蜡Aesculap1029754
卡波姆眼用凝胶 2 mg/gParanova
棉签Heinz HerenzWA-1
棉签棒 × 4Selefa120788
皮下注射针头,23 G × 2KD Medical900284连接至三通阀,移除远端
皮下注射针头,23 G × 3KD Medical900284移除远端,2 个连接至三通阀,1 个连接至注射器
颅内压(ICP)探头:自制由以下材料制成:
聚乙烯管,20 mmSmiths medical800/100/200内径(ID):0.58 mm,外径(OD):0.96 mm
硅胶管,10 mmFisher15202710ID:0.76 mm,OD:2.4 mm
硅胶管,2 mmFisher11716513ID:1.0 mm,OD:3.0 mm
微量毛细管离心管Brand7493 11
手术巾,45 cm × 75 cmMölnlycke800430
PinPort 接头,22 GInstechPNP3F22
PinPort 注射器InstechPNP3M
聚乙烯管,2 × 20 cmSmiths medical800/100/200连接至注射器,ID:0.58 mm,OD:0.96 mm
橡皮筋未知
手术刀,10 号刀片Kiato23110
脊髓穿刺针,25 G × 3.5''Braun5405905-01
三通阀系统,Discofix × 2Braun16494C连接至换能器
缝线,4-0,单股,不可吸收 × 3EthiconEH7145H
注射器,1 mLBD Plastipak1710023
注射器,鲁尔锁,10 mL × 4BD Plastipak305959连接至换能器
组织粘合胶3M1469SB
0.5% 氯己定乙醇溶液Faaborg Pharma210918
卡洛芬 50 mg/mLScanVet43715稀释 1:10
异氟烷Baxter
等渗盐水Amgros16404
利多卡因-肾上腺素 10 mg/5 µg/mLAmgros16318

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