一种在Drosophila中诱导闭合性头部创伤性脑损伤的方法

摘要

来源：Katzenberger, R. J., 等，一种在Drosophila中诱发闭合性头部创伤性脑损伤的方法。J. Vis. Exp. (2015)。

该视频展示了使用高冲击创伤（HIT）装置在Drosophila中诱导闭合性颅脑损伤（TBI）的方法。TBI引起机械性脑损伤，影响神经元功能，并随时间推移导致神经变性和死亡。

方案

1. HIT 装置的构建

1. 使用两个夹子和四颗螺丝将弹簧固定在木板上（图1A）。夹子应相对于木板宽度居中放置，并彼此紧贴，外侧夹子与木板边缘对齐。在安装夹子之前，需使用钳子将其弯曲，使其紧密贴合弹簧。
   注意：构建HIT装置所需材料的说明见表1。弹簧的夹持端应距离木板边缘1/8英寸（3.2 mm），自由端应伸出木板边缘3/4英寸（19 mm）。调整弹簧位置，使其与木板长度方向平行。
2. 将魔术贴毛面胶带在弹簧的自由端缠绕一圈。魔术贴的外边缘应与弹簧末端对齐。魔术贴的作用至关重要，因其可通过紧密压合固定将小瓶固定在弹簧上。同时，魔术贴也便于小瓶的快速连接与拆卸，从而可在短时间内处理多个小瓶。
3. 将冰桶盖倒置，居中紧贴木板放置。调整冰桶盖的凸起区域，使其长边与木板宽度方向平行。注意冰桶的凸起区域比木板高出1/2英寸（13 mm），因此当小瓶固定在弹簧上时，弹簧不会完全平贴于木板表面。
4. 将整个装置沿固定物体（如墙壁）滑动，使冰桶盖楔入木板与固定物体之间，确保装置不会移动。
5. 将纸质量角器用胶带固定在纸板果蝇小瓶托盘底部，并将托盘竖直立于木板长度方向一侧，使弹簧向后拉至完全垂直位置时，量角器的90°刻度与弹簧对齐。

HI....

结果

图1：HIT 装置示意图。（A）HIT 装置静止状态下顶部视图的示意图。（B）HIT 装置的侧面视图示意图。图中显示弹簧处于静止位置（深红色）和偏转至 90° 的位置（浅红色）。

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材料

本文使用的材料清单

姓名	公司	目录编号	评论
镀锌压缩弹簧	The Hillman Group	540189	9 7/8 英寸（长度），15/16 英寸（外径），0.12 英寸（线径）
木板			9 英寸（长度），6.5 英寸（宽度），0.75 英寸（高度）
夹具	Sigma Electrical Manufacturing Corporation	49822	3.10 英寸（长度），0.68 英寸（宽度），1.11 英寸（高度），EMT 双孔卡箍，点击类型可选择 1 英寸钢制 EMT 导管
自粘式尼龙搭扣环形部分			3 英寸（长度），3/4 英寸（宽度）
聚氨酯冰桶盖	Fisher Scientific	02-591-45	9 1/8 英寸（长度），9 1/8 英寸（宽度），1 1/4 英寸（高度）
塑料果蝇小瓶	Applied Scientific	AS-510	3 11/16 英寸（高度），1 1/16 英寸（内径），1 1/8 英寸（外径）
大号棉球	Fisher Scientific	22-456-883
纸质量角器			10 英寸（直径）