一种立体定向引导的听觉皮层损毁技术用于大鼠听觉皮层切除

摘要

来源：Lamas, V.，等。大鼠听觉皮层的立体定向消融及脑内病灶定位。J. Vis. Exp. (2017)。

本视频演示了一种在大鼠中进行的立体定向引导手术，用于损毁听觉皮层。步骤包括：将麻醉后的大鼠固定于立体定向仪中，识别解剖学标志；在听觉皮层上方的颅骨处开窗；吸除皮层各层组织；并提供术后护理，以评估损毁对声音处理功能的影响。

方案

所有涉及动物模型的实验程序均已通过当地机构动物护理委员会和 JoVE 兽医审查委员会的审核。

1. 大鼠的准备

注意：我们使用雄性大鼠进行实验，以避免任何激素变化的影响。

1. 通过肌肉注射氯胺酮盐酸盐（30 mg/kg）和赛拉嗪盐酸盐（5 mg/kg）的混合物对动物进行麻醉；此剂量下，大鼠应处于深度麻醉状态约1小时。
2. 轻捏大鼠脚趾；若无回缩反射，则表明动物已完全失去意识。若大鼠对刺激有反应，应追加初始剂量三分之一的麻醉剂。
3. 剃除头皮毛发，并用聚维酮碘对术区进行消毒。
4. 将动物置于加热垫上以维持体温在38 °C，并使用两个耳杆和一个咬合杆将动物头部固定于立体定位仪中。操作时需小心，避免耳杆刺破鼓膜。
5. 通过在每只眼睛上滴加一滴眼用凝胶或生理盐水来保护角膜。

2. 大鼠颞骨中交流电位置

1. 使用手术刀沿中线切开，暴露颅骨，并剥离覆盖颅骨表面的骨膜。
2. 用无菌棉签轻轻擦去覆盖颅骨表面的血液，根据 Paxinos 和 Watson 大鼠脑图谱确定前囟（bregma）、后囟（lambda）和耳间0点（interaural 0）的位....

结果

图1：大鼠颞骨在三个不同手术步骤中的图像。（A）将前连合（AC）的立体定位坐标转移至颞骨。四个点的坐标分别为：A：前后（A/P）= -5.8 mm，内外（M/L）= ±6.4 mm；B：前后（A/P）= -2.7 mm，内外（M/L）= ±6.4 mm；C：前后（A/P）= -2.7 mm，内外（M/L）= ±8.67 mm；D：前后（A/P）= -5.8 mm，内外（M/L）= ±8.67 mm。（B）以上述坐标为参考，在颞骨表面绘制一个矩形，用于指导开窗位置。（C）钻骨后暴露的骨窗。可见脑表面的软脑膜及血管。R：吻侧，D：背侧。

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材料

本文使用的材料清单

姓名	公司	目录编号	评论
立体定位仪	David Kopf Ins.	900
手术显微镜	WILD M650 Heerbrugg
加热垫	DAGA
牙科微电机	W&H elco	5118
金刚砂钻头	B Braun	GD021R	0.6 mm
外科吸引装置	Atmos	Atmoforte E2
氯胺酮	Merial		30 mg/kg
赛拉嗪	Bayer		5 mg/kg
显微操作器	Narishige	SM-11
手术刀	Lawton
聚维酮碘	Meda	Betadine
无菌生理盐水	B.Braun
20G 无菌针头	Terumo Neolus
棉签
缝合材料	B.Braun
抗生素软膏	Quadriderm (Betametasona, Gentamicina, Clotrimazol) - Schering-Plough
镊子	dimeda	10.331.12
手术缝合针	World Precision Instruments	501940
丁丙诺啡	Indivior UK	Buprex	0.01-0.05 mg/kg
剪刀	dimeda	08.120.15
显微外科刀	MSP	7503
可吸收止血纱布	Surgicel
伤口夹	Reflex 9		9 mm