需要JoVE订阅才能观看此内容。 请登录或开始免费试用

方法文章

使用侧向液体冲击装置在大鼠模型中诱导创伤性脑损伤

1.2K 次观看

⸱

2025年7月8日

本文内容

摘要

来源:McGuire, M. J.,等。使用无线视频脑电图系统监测侧向液体冲击所致创伤性脑损伤后的癫痫样放电。J. Vis. Exp. (2019)

本视频演示了使用侧向液体脉冲损伤(FPI)装置在大鼠中诱导创伤性脑损伤(TBI)的方法。该操作包括在麻醉大鼠的颅骨上钻孔以暴露硬脑膜,并将套管固定于其上。随后将大鼠连接至装置,装置产生的压力波传递至大脑,通过引起神经细胞死亡和血管损伤来模拟创伤性脑损伤。

方案

1. 液体冲击损伤

  1. 穿戴实验服或手术服、外科口罩、外科手套和头套,并对所有接触手术部位的器械和材料进行灭菌。
  2. 将一只10-12周龄、雄性、Wistar大鼠(350-400 g)置于合适大小的诱导麻醉舱中,使用3%异氟烷和1 L/min氧气进行麻醉。待大鼠失去意识后,将其从诱导舱中取出并转移至准备区。将无菌眼用软膏涂抹于双眼。
  3. 使用装有#40刀头的电动剪毛器,从眼睛上方至耳后基部剃除大鼠头部的毛发 ,以获得足够的手术视野。清除手术区域内的所有松散毛发。
  4. 用2%氯己定溶液擦拭剃净的头皮,随后使用70%乙醇消毒。从中心开始,以同心圆方式向外扩展,远离切口部位。重复此过程3次。以相同方式涂抹碘伏溶液,并待其自然干燥。 
  5. 将麻醉后的大鼠固定于立体定位仪中,并通过鼻罩持续给予2-3%异氟烷和1 L/min氧气维持麻醉。检查后肢回缩反射和眼睑反射是否消失,以确认大鼠处于手术麻醉水平。
  6. 在整个手术过程中监测呼吸频率、心率、体温和血氧饱和度。维持心率在300-400次/分钟之间,SpO2 高于90%。
    注意:可将脉搏血氧仪连接至后肢足部,持续显示心率和SpO2。若心率超过400次/分钟,提示麻醉深度不足。可在大鼠身下放置一个与直肠温度计联动的自调节加热垫,设定温度为37 °....

访问受限。请登录或开始试用以查看此内容。

材料

本文使用的材料清单
姓名公司目录编号评论
1.00 mm 钻头Drill Bit City: New Carbide Tools05M200
3M ESPE Durelon 羧酸盐水门汀3M , Neuss Germany38019牙科水门汀
4-0 缝合线Ethicon, Sommerville, NJK831H4-0 Ethicon Perma-hand Silk, 26mm 1/2c Taperpoint, 30" (75cm), 黑色编织不可吸收缝合线
5 mm 外径环钻Fine Science Tools18004-50
Dumont #6 镊子Fine Science Tools11260-20
Dumont #7b 镊子Fine Science Tools11270-20
ecgAUTOEMKA Technologies, Falls Church, VA
雌性鲁尔螺纹式接头透明聚碳酸酯Cole-Palmer instrumentSKO#45501-22订购批次 #214271
脚踏式电钻Grobet USA, Carlstadt, NJ型号 C-300
GentaMax 100(硫酸庆大霉素溶液)Phoenix, Manufactured by Clipper Distributing Company LLC, St.
Joseph, MO
NDC 57319-520-05
Hill's 处方饮食 a/d 犬/猫用罐头Hill's Pet Nutrition, Inc. , Topeka, KS
IOX2 软件EMKA Technologies, Falls Church, VA
异氟烷,USPPiramal Enterprise Limited, Andhra, IndiaNDC 66794-013-25
IsoTech 麻醉机SurgiVetWWV9000
侧方 FPI 装置AmScien302弯曲尖端,带压力管延长段,通过螺口连接器(Cole-Palmer;#4550-22)连接
Leica A60 体视显微镜Leica Biosystems, Richmond, VA货号: 10 450 488
Marcaine(0.5%)布比卡因盐酸注射液 USP 5 mg/mLHospira, Lake Forest, ILCA-362750mL 多剂量瓶;NDC 0409-1610-50
微型 Adson 镊子Fine Science Tools11018-12
带剪线器的 Olsen-Hegar 持针钳Fine Science Tools12002-14
含庆大霉素的 PALACOS R+G 骨水泥Heraeus,货号: 5036964含 1 × 0.5g 庆大霉素的X线显影骨水泥
聚维酮碘溶液贝他碘(Betadine)
Puralube Vet 软膏Dechra Veterinary Products, Overland Park KSNDC 17033-211-38
手术刀片(#10)及刀柄Integra Miltex, York, PA货号: 4-110
手术刀柄 - #4Fine Science Tools10004-13
镰状刀Bausch + Lomb Storz InstrumentsN1705 HM5mm 弯曲刀片,圆形手柄,总长 168mm,6.6 英寸
Silverstein 微型镜Bausch + Lomb Storz InstrumentsN1706 S8直径 3mm,倾斜 45 度,总长 180mm,7.2 英寸
热凝止血装置Geiger Medical Technology, Delasco Council Bluffs, IA型号 NO: 150
VetivexDechra Veterinary Products, Overland Park KS兽用 pHyLyteTM 注射液 pH
7.4(多种电解质注射液,类型 1,USP)
Wistar IGS 大鼠Charles River品系编号 003损伤时为 12 周龄
Wullstein 拉钩Fine Science Tools17018-11

探索更多文章

液体打击损伤大鼠创伤性脑损伤模型颅骨切除术牙科水泥套管立体定位仪压力波诱导神经细胞死亡退缩反射