通过慢性应激暴露诱导和评估小鼠抑郁状态

摘要

来源：Yan, Z.，等．逍遥散对慢性应激小鼠抗抑郁作用的评价．J. Vis. Exp. （2019）．

该视频展示了建立慢性应激诱导抑郁症小鼠模型并评估抑郁样行为的过程。长期施加多种应激因素会触发皮质酮的释放，导致神经元过度兴奋并最终发生神经元死亡，从而在小鼠中产生类似抑郁症的症状。

方案

所有涉及动物模型的操作均已通过当地机构动物护理委员会和JoVE兽医审查委员会的审核。

1. 实验操作前小鼠的准备

注意： 实验选用12周龄健康的雄性C57BL/6J小鼠，每只小鼠体重在18至22 g之间。

1. 在开始CUMS实验前一周，将小鼠单独饲养于典型的无特定病原体（SPF）级实验动物房中（22 ± 1 °C，12 h/12 h明暗循环，相对湿度：30–40%）。
2. 根据小鼠体重，将其随机分为对照组和模型组，每组各15只。
3. 实验开始前，使用记号笔在每只小鼠的尾部编号。

2. 小鼠抑郁模型的建立

注意：为诱导抑郁，模型组及两个治疗组的小鼠接受为期21天的慢性不可预测性轻度应激（CUMS）处理。方案可根据实际情况调整，但应遵循同一应激源不可连续使用的原则。

1. 连续21天每天使小鼠暴露于以下七种应激源中的任意两种。我们的造模方案设计如下：
   1. 周一，使小鼠经历食物剥夺（清空每只笼子的饲料，持续24小时，上午8:00至次日上午8:00）和饮水剥夺（移除每只笼子的饮水瓶，持续24小时，上午8:00至次日上午8:00）。
   2. 周二，使小鼠经历束缚应激（将小鼠置于小型塑料容器中束缚3小时，上午8:00至11:00）和空笼应激（移除每只笼子的垫料，持续11小时，上午8:00至晚上19:00）。
   3. 周三，使小鼠经历潮湿污染笼具（向每只笼子中倒入水并保持湿润24小时，上午8:00至次日上午8:00）和拥挤笼具（每笼放入5只小鼠，持续24小时，上午8:00至次日上午8:00）。
   4. 周四，使小鼠经历束缚应激和冰水游泳（强迫每只小鼠在装有冰水的透明玻璃水族箱中游泳5分钟）。
   5. 周五，使小鼠经历潮湿污染笼具和食物剥夺。
   6. 周六，使小鼠经历束缚应激和拥挤笼具。
   7. 周日，使小鼠经历空笼应激和冰水游泳。
2. 每周记录一次小鼠的被毛状态和体重，直至造模结束（第21天）。被毛状态总分按七个不同身体部位（头部、颈部、背部被毛、腹部被毛、前爪、尾部和后爪）的评分之和计算。评分为1表示被毛整洁，评分为0表示被毛凌乱。

材料

本文使用的材料清单

姓名	公司	目录编号	评论
C57BL/6j 小鼠	查尔斯北京维通利华 河流公司	SCXK 2011-0004	从查尔斯河公司北京维通利华实验动物技术有限公司购买60只12周龄的健康雄性C57BL/6J小鼠。
小鼠笼具	生物技术的呈现方式	34853016	318×202×135 毫米
蒸馏水			实验过程中使用了水。
ACS-2EAS 电子天平	北京恒中恒电子科技有限公司		用于称量不同阶段小鼠的体重。
SPSS Statistics 21.0 软件	IBM		采用 SPSS 21.0 软件进行数据分析，根据正态性检验和方差齐性检验结果，对一般资料采用单因素方差分析或非参数检验，组间比较采用 LSD 法。
Graphpad Prism 6.0 软件	Graphpad Software, Inc. USA -		使用 Graphpad Prism 6.0 软件绘制统计图。