通过长时间高音量声音暴露诱导小鼠听力损失

摘要

来源：Lee, D. et. al., 小鼠噪声性听力损失的改良实验条件及听力功能与外毛细胞损伤评估。J. Vis. Exp. (2023)

本视频演示了小鼠噪声性听力损失的实验过程。高强度声音会损伤内耳中的毛细胞，并破坏听觉通路，从而导致听力受损。

方案

所有涉及动物模型的操作均已通过当地机构动物护理委员会和 JoVE 兽医审查委员会的审核。

1. 小鼠噪声性听力损失（NIHL）的诱导

1. 准备实验小鼠的笼子
   1. 使用尺寸为 14 cm × 17 cm × 24 cm 的大鼠捕鼠笼。将四块波纹塑料板裁剪成合适大小，使其能够适配笼子（尺寸分别为 13 cm × 23 cm 和 13 cm × 16 cm）。
   2. 为防止小鼠脚部被金属网划伤，将其中两块塑料板分别置于笼底和后侧。另将剩余两块塑料板相互垂直交错放置，将笼内空间均分为四个区域。
2. 在隔音箱中进行本实验。将扬声器置于笼子前方 8.5 cm 处，并将扬声器与笼子一同放入隔音箱内。
3. 打开 CLIO 应用软件。
4. 将光标移至扬声器图标，然后点击 TwoSin。将 Freq 1 的值设为 1000 Hz，Freq 2 的值设为 6000 Hz，然后点击 OK 开始播放声音。
5. 在 Leq 选项卡下，将分贝伏特（dBV）更改为声压级分贝（dBSPL）。在软件界面上设置好时间后，点击绿色三角形按钮开始播放声音。
6. 在扬声器前方 8.5 cm 处放置一个麦克风，用于校准噪声水平（图 1）。将噪声水平调节至 125 dB SPL-A，并持续监测不少于 3 分钟，以确保噪声水平足够稳定。使用信号发生器、分析仪和放大器来生成并控制噪声（图 2）。
   注意：此步骤应在隔音箱内进行，以避免对操作人员听力造成损伤。
7. 将四只雄性 C57BL/6J 小鼠放入笼子中（每区一只），进行噪声暴露。在噪声暴露期间，随机分配各区域中的小鼠。在笼子顶部放置一个麦克风，用于在噪声暴露过程中监测噪声水平（图 3）。
   注意：此步骤应在隔音箱内进行，以避免对操作人员听力造成损伤。
8. 使小鼠每日连续暴露于 1 kHz 和 6 kHz 频率的噪声中，每天暴露 6 小时，连续 5 天。

结果

图 1：根据校准计算电压。 对于每个特定频率，将所选电压值（横轴）输入校准曲线，以获得相应的声音强度值（纵轴）。

材料

本文使用的材料清单

姓名	公司	目录编号	评论
1/4英寸CCP自由场标准传声器套装	GRAS	428158	用于噪声暴露
大鼠捕鼠笼			14 cm x 17 cm x 24 cm
声音放大器，MT-1000	unika		用于噪声暴露
声音发生器/分析仪/其他，FW-02	CLIO	620300719	用于噪声暴露
隔音室	IEA Electro-Acoustic Technology		用于噪声暴露和ABR
扬声器	IEA Electro-Acoustic Technology		用于噪声暴露