测量小鼠的听觉脑干反应

摘要

来源：Lee, D., 等．小鼠噪声性听力损失的改良实验条件及听力功能与外毛细胞损伤评估．J. Vis. Exp．（2023）

本视频演示了在小鼠中测量听觉脑干反应（ABR）的方法。将电极放置于麻醉小鼠的头部、耳后以及尾部附近。给予不同强度的声学刺激，并将产生的电信号记录为波形。

方案

所有涉及动物模型的操作均已通过当地机构动物护理委员会和 JoVE 兽医审查委员会的审核。

1. 基于听觉脑干反应（ABR）的听力阈值评估

1. 使用专为小型动物设计的商用听性脑干反应（ABR）检测系统。
2. 通过腹腔注射给予小鼠替来他明与唑拉西泮混合物（40 mg/kg）和赛拉嗪（9.3 mg/kg），以实现全身麻醉。
   注意：ABR检测过程约需2小时。确保使用加热垫提供保温支持，并涂抹眼药膏以防止小鼠在麻醉期间角膜干燥。
3. 在全身麻醉状态下测量小鼠的ABR。将皮下针电极（12 mm）置于头顶、左耳耳廓后方以及尾部附近，用于测定听觉阈值。
4. 使用放置于动物左耳1 cm处的扬声器呈现声学刺激。
5. 使用示波器控制声学刺激。选择正弦波作为刺激信号，将窗口刻度设为10 k。调节频率旋钮以获得所需声刺激频率。
6. 通过调节函数发生器上的振幅或AMLP旋钮来调整刺激强度。根据校准结果计算出合适的电压值，并通过调节AMLP旋钮获得所需的刺激强度。
7. 在一系列刺激强度下采集ABR数据，强度范围从10 dB声压级（SPL）到100 dB SPL，步长为10 dB。
   注意：应在隔音室内测量听觉阈值。将所记录信号中可辨识出波V的最低刺激强度定义为ABR阈值 （图1）。完成ABR检测后，持续监测动物直至其从麻醉中恢复（约1小时）。

结果

图1：听觉的ABR测量。 在噪声暴露后1周（第13天）采集的12 kHz频率下的代表性ABR结果。若可识别，则对各强度下的V波进行标注。

材料

本文使用的材料清单

姓名	公司	目录编号	评论
1/4英寸 CCP 自由场标准麦克风套装	GRAS	428158	用于噪声暴露
放大器输入模块 AMI100D	BIOPAC		用于听觉脑干反应
生物放大器 BIO100C	BIOPAC		用于听觉脑干反应
诱发电位放大器 ERS100C	BIOPAC		用于听觉脑干反应
高性能数据采集系统 MP160	BIOPAC		用于听觉脑干反应
模块化扩展电缆 MEC110C	BIOPAC		用于听觉脑干反应
针式电极，单极 12 mmTp，EL452	BIOPAC		用于听觉脑干反应
ROMPUN- 哌替啶注射液，溶液	Bayer HealthCare, LLC
声音放大器 MT-1000	unika		用于噪声暴露
声音发生器/分析仪/杂项 FW-02	CLIO	620300719	用于噪声暴露
隔声室	IEA Electro-Acoustic Technology		用于噪声暴露和听觉脑干反应
扬声器	IEA Electro-Acoustic Technology		用于噪声暴露
刺激器模块 STM100C	BIOPAC		用于听觉脑干反应
耳机管套装 OUT101	BIOPAC		用于听觉脑干反应
赛拉嗪	Virbac