测量小鼠的听觉脑干反应

摘要

资料来源：Lee， D.， et.al 的修改了小鼠噪声性听力损失的实验条件以及听力功能和外毛细胞损伤的评估。J. Vis. Exp.(2023)

该视频演示了小鼠听觉脑干反应 （ABR） 的测量。电极放置在麻醉小鼠的头部、耳后和尾巴附近。传递不同强度的声学刺激，并将产生的电信号记录为波形。

方案

所有涉及动物模型的程序均已由当地机构动物护理委员会和 JoVE 兽医审查委员会审查。

1. 基于听觉脑干反应 （ABR） 的听力阈值评估

1. 使用专为小动物设计的商用 ABR 测试系统。
2. 腹膜内注射平达胺和唑拉西泮 （40 mg/kg） 和甲苯噻嗪 （9.3 mg/kg） 的混合物到小鼠体内进行全身麻醉。
   注意： ABR 评估需要 ~2 小时。确保通过加热垫提供热支持，并涂抹眼药膏以防止鼠标处于麻醉状态时干燥。
3. 在全身麻醉下测量小鼠的 ABR。将皮下针状电极 （12 mm） 放在左耳耳廓后面的顶点，然后放回尾部附近，以测量听力阈值。
4. 使用放置在距离动物左耳 1 厘米的扬声器呈现声学刺激。
5. 使用示波器控制声刺激。选择 Sine Wave 作为刺激，选择 10 k 作为窗口刻度。转动 频率 旋钮以获得所需的声学刺激频率。
6. 通过转动函数发生器上的 振幅或 AMLP 旋钮来调整刺激强度。通过将 AMLP 旋钮旋转到合适的电压（根据校准计算得出）来获得所需的刺激强度。
7. 在一系列刺激强度下收集 ABR 测量值，从 10 dB 声压级到 100 dB SPL，步长为 10 dB。
   注意： 在隔音箱中测量听力阈值。假设在收集的信号中可以产生可辨别的波 V 的最小刺激强度水平是 ABR 阈值 （图 1）。ABR 评估后，监测动物直至其从麻醉中恢复 （~1 小时）。

结果

图 1：听力的 ABR 测量。在第 13 天（噪声暴露后 1 周）收集的 12 kHz 下的代表性 ABR 结果。如果可辨别，则标记每种强度的 V 波。

材料