小鼠模型中轻度创伤性脑损伤的诱导

摘要

来源：Macheda, T.，等。小鼠轻度创伤性脑损伤的电磁控制闭合式头部模型。J. Vis. Exp. (2022)

本视频演示了使用立体定位仪在小鼠模型中诱导闭合性头部损伤的操作步骤。通过控制冲击力度模拟轻度创伤性脑损伤，使研究人员能够通过测量损伤后的反射和行为变化来研究神经功能影响及恢复情况。

方案

所有涉及动物模型的实验程序均已通过当地机构动物护理委员会和 JoVE 兽医审查委员会的审核。

1. 手术操作

1. 使用轻质乙缩醛树脂锥形耳棒、咬合杆和小鼠麻醉面罩将小鼠固定在立体定位架上（见图1G, H）。在室空气中以100–200 mL/min的流速输送2%–3%的异氟烷气体。密切监测小鼠的呼吸，以确保麻醉深度，并根据需要调整气体浓度。
2. 将无菌眼用润滑剂涂抹于眼睛，防止角膜干燥。
3. 用聚维酮碘棉签和无菌酒精棉片对头皮进行三次消毒。

结果

图1：步骤1：手术区域设置。（A）显示进行CHI手术所需的手术区域及工具示例（用于撞击器的冰袋、配备撞击器的立体定位仪、撞击器控制箱以及手术器械）。（B）5 mm钢制探针头、咬合杆和头部支撑装置的特写图，展示了中线撞击所需的定位方式。（C）头部支撑装置由一个1 mL乳胶移液器吸头通过Parafilm膜连接至导管制成；使用10 mL注射器注水以充盈吸头，并通过旋塞阀在定位后保持吸头充盈状态。（D）撞击器控制箱：（1）用于调节撞击速度的大旋钮，（2）停留时.......

材料

本文使用的材料清单

姓名	公司	目录编号	评论
9 mm 自动夹施加器	Braintree Scientific	ACS-APL	外科手术
9 mm 自动夹移除器	Braintree Scientific	ACS-RMV	外科手术
9 mm 自动夹，每箱 1,000 个夹子	Braintree Scientific	ACS-CS	外科手术（缝合钉）
Aperio ImageScope 软件	Leica BioSystems	NA	免疫组化
BladeFLASK 刀片移除器	Fisher Scientific	22-444-275	外科手术
棉签涂抹器	VWR	89031-270	外科手术
数字小鼠立体定位仪	Stoelting	51730D	外科手术
Dumont #7 镊子	Roboz	RS-5047	外科手术
耳杆	Stoelting	51649	外科手术
EthoVision XT 11.0	Noldus Information Technology	NA	RAWM
Fiber-Lite	Dolan-Jenner Industries	UN16103-DG	外科手术
Fisherbrand 小移液管用吸头	Fisher Scientific	03-448-21	头部支撑装置
Gemini 回避系统	San Diego Instruments	NA	主动回避
加热垫	Sunbeam	732500000U	术前准备
HRP 标记的山羊抗兔 IgG	Jackson Immuno Research Laboratories	111-065-144	免疫组化
诱导室	Kent Scientific	VetFlo-0530XS	术前准备
异氟烷，USP	Covetrus	NDC: 11695-6777-2	外科手术
小鼠气体麻醉头固定装置	Stoelting	51609M	外科手术
Neuropactor 立体定位撞击器	Neuroscience Tools	n/a	外科手术：曾由 Leica 以 Impact One 名义销售
NexGen 小鼠 500	Allentown	n/a	术后饲养笼
Parafilm	Bemis	PM992	头部支撑装置
Peanut 专业毛发修剪器	Whal	8655-200	术前准备
聚维酮碘溶液 USP，10% (w/v)，含有效碘 1% (w/v)，用于实验室	Ricca	3955-16	外科手术
Puralube Vet 软膏，凡士林眼用软膏，无菌眼部润滑剂	Dechra	17033-211-38	外科手术
兔抗 GFAP 抗体	Dako	Z0334	免疫组化
兔抗 IBA1 抗体	Wako	019-19741	免疫组化
8 臂放射状水迷宫	MazeEngineers	n/a	RAWM
天平	OHAUS CS 系列	BAL-101	术前准备
#7 型实心手术刀柄，6.25 英寸	Roboz	RS-9847	外科手术
无菌酒精擦拭垫（70% v/v 异丙醇）	Fisher Brand	22-363-750	术前准备
SumnoSuite 低流量麻醉系统	Kent Scientific	SS-01	外科手术
10 mL 鲁尔锁接头注射器	BD Bard-Parker	302995	头部支撑装置
计时器	Fisher Scientific	6KED8	外科手术
局部麻醉乳膏	L.M.X 4	NDC 0496-0882-15	术前准备
三重抗生素软膏	Major	NDC 0904-0734-31	术后护理
管路	MasterFlex	96410-16	头部支撑装置
单通道麻醉蒸发器系统	Kent Scientific	VetFlo-1210S	术前准备